Los bosques primarios juegan un papel vital en la conservación de la biodiversidad terrestre, aunque son raros y están cada vez más amenazados en todo el mundo. La región mediterránea alberga ejemplos notables de estos ecosistemas, pero la información sobre su ubicación, estructura y biodiversidad sigue siendo en gran medida incompleta. En este trabajo, probamos la hipótesis de que la región de Toscana (Italia) alberga sitios forestales con características de bosque primario a la luz de los indicadores de la UE y las directrices ministeriales italianas. En consecuencia, se recopilaron datos sobre variables de diversidad estructural y de plantas en 27 parcelas ubicadas en sitios preseleccionados a través de diferentes tipos de bosques de la región. Como resultado, se inventariaron 12 sitios que pueden ser propuestos como candidatos para la red nacional de bosques primarios. Estos eran en gran medida desconocidos, con una superficie de aproximadamente 10-300 ha y abarcando cinco tipos principales de bosques en 14 hábitats de Natura2000. Todos los rodales han alcanzado la etapa madura o casi senescente gracias a procesos dinámicos naturales durante más de 70 años después de la cesación de disturbios antropogénicos sustanciales. El índice de heterogeneidad estructural (IHS), basado en variables de biomasa de madera viva y muerta, fue relativamente alto (66.2-84%). Sin embargo, las variables estructurales dependían del tipo de bosque, y por lo tanto del contexto bioclimático y las especies de árboles dominantes. Los rodales con haya y coníferas de montaña mostraron características de bosque primario más pronunciadas que los rodales mediterráneos debido a una dinámica de recuperación más rápida tras la cesación del disturbio. Se registraron hasta 193 taxones de plantas vasculares, con 16 especies que ocurren con árboles >= 50 cm de diámetro. Los taxones especialistas de bosques, ya sean leñosos o herbáceos, fueron prevalentes, pero también ocurrieron numerosos generalistas en los claros. Las especies de bosques antiguos también estaban bien representadas, apoyando la larga continuidad temporal de los bosques. Este trabajo avanza en el conocimiento sobre sitios forestales con características de bosque primario en el sur de Europa, contribuyendo a la implementación de la red nacional y la Estrategia de Biodiversidad de la UE 2030. La protección estricta de estos sitios es necesaria para permitir que los rodales forestales alcancen plenamente la etapa de bosque primario en las próximas décadas, a pesar de la influencia negativa del cambio climático.