Los glucocorticoides (GC) son hormonas esteroides mamíferas involucradas en una variedad de procesos fisiológicos, incluyendo el metabolismo, la respuesta inmune y las funciones cardiovasculares. Debido a su vínculo con la respuesta fisiológica al estrés, la medición de GC es una herramienta valiosa para la conservación y la evaluación del bienestar en poblaciones animales. Los niveles de GC se pueden medir a partir de diferentes matrices, como la orina y las heces. Además, especialmente en entornos de cautiverio, medir los GC a partir de muestras de saliva ha demostrado ser particularmente útil, ya que estas muestras se pueden recolectar de manera no invasiva y fácilmente de animales entrenados. Los niveles de GC salivales se pueden medir utilizando una variedad de métodos analíticos, como los inmunoensayos enzimáticos. Sin embargo, es crucial validar el método analítico para cada aplicación y especie específica al utilizar una nueva matriz. Utilizando cromatografía líquida de alta presión y un inmunoensayo enzimático de cortisol, mostramos que los principales glucocorticoides secretados en la saliva de los monos ardilla y los monos capuchinos marrones son el cortisol y la cortisona. Nuestra validación biológica encontró que el nivel esperado de cortisol salival disminuye a lo largo del día. Nuestros hallazgos respaldan la fiabilidad de las mediciones de cortisol salival y su potencial para ser utilizadas como una herramienta válida en la investigación y la evaluación del bienestar de estos primates no humanos.