El canal de sodio epitelial (ENaC) expresado en el riñón juega un papel importante en el mantenimiento del equilibrio total de sal en el cuerpo y la regulación de la presión arterial. La actividad del canal de sodio epitelial está regulada positivamente por la disponibilidad de lípidos aniónicos en la membrana plasmática y regulada negativamente por el aumento de los niveles de calcio intracelular. Aquí, investigamos la regulación del canal de sodio epitelial por el lípido esfingomielina (SM) en pequeñas vesículas extracelulares aisladas de la orina de ratones con hipertensión y diabetes en comparación con ratones con solo diabetes. La actividad del canal de sodio epitelial se midió en dos tipos diferentes de células renales después de que las células fueron tratadas con pequeñas vesículas extracelulares con alto contenido de esfingomielina de los dos grupos de ratones y después de la reducción de enzimas que generan esfingomielina. En este estudio, mostramos que el aumento del contenido de esfingomielina en pequeñas vesículas extracelulares de ratones con hipertensión y diabetes aumenta la actividad del canal de sodio epitelial en dos tipos diferentes de células renales de manera dependiente del tiempo. La reducción de enzimas que generan esfingomielina mostró resultados similares. Mecanísticamente, la inhibición de la entrada de calcio fue presumiblemente responsable del efecto del contenido de esfingomielina en pequeñas vesículas extracelulares sobre la actividad del canal de sodio epitelial. En conjunto, los resultados de este estudio proporcionarán una mejor comprensión de la regulación de la actividad del canal de sodio epitelial en el riñón durante el desarrollo de hipertensión secundaria a la diabetes.