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The Anticancer Activity of Lycium barbarum Polysaccharide by Inhibiting Autophagy in Human Skin Squamous Cell Carcinoma Cells In Vitro and In VivoActividad anticancerígena del polisacárido de Lycium barbarum mediante la inhibición de la autofagia en células de carcinoma de células escamosas de piel humana in vitro e in vivo

Resumen

Objetivo. El objetivo de este estudio es investigar los efectos del polisacárido de Lycium barbarum (LBP) sobre la proliferación y la apoptosis de las células humanas A431 de carcinoma escamoso cutáneo in vitro e in vivo a través de su regulación sobre la autofagia. Métodos. Experimento in vitro: Las células A431 se trataron con diferentes concentraciones de LBP, y la viabilidad celular se midió por el método CCK8. Se utilizó citometría de flujo para detectar la tasa de apoptosis celular. La expresión de Ki67, PCNA, cl-caspasa-3, Bcl-2 y LC3II y el estado de fosforilación de JNK y ERK1/2, así como el efecto del cotratamiento con SP600125 sobre la expresión de proteínas asociadas a la autofagia y la apoptosis, se determinaron mediante Western blot. Experimento in vivo: se estableció un modelo de tumor trasplantado mediante inyección subcutánea de células A431 a ratones desnudos. Se inyectaron 50 mg/kg de LBP en los ratones por vía intraperitoneal; la tasa de supervivencia de los ratones, el volumen y el peso del tumor se determinaron al trigésimo día. La expresión de las proteínas Ki67 y MMP-2 se midió mediante inmunohistoquímica. Resultados. La LBP en concentraciones de 400 μg/ml y superiores fue significativamente citotóxica para las células A431, mientras que, dentro del rango de dosis de 50 μg/ml~200 μg/ml, la LBP inhibió significativamente la expresión de las proteínas Ki67 y PCNA, promovió la expresión de cl-caspasa-3, inhibió la expresión de la proteína Bcl-2, reguló a la baja la expresión del marcador de autofagia LC3II, y redujo la fosforilación de ERK1/2, mientras que el nivel de fosforilación de JNK se incrementó. Al mismo tiempo, la regulación de Beclin1, LC3II, Bcl-2, y cl-caspasa-3 por LBP fue revertida eficazmente por el cotratamiento de SP600125. Además, la LBP aumentó la tasa de supervivencia de los ratones desnudos trasplantados, redujo el volumen y el peso del tumor, y reguló a la baja la expresión de Ki67 y MMP-2. Conclusiones. La LBP puede inducir la apoptosis de las células A431 mediante la inhibición de la autofagia e inhibir el crecimiento tumoral in vivo.

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