La tuberculosis bovina (bTB) es una infección altamente transmisible y sigue siendo motivo de gran preocupación como zoonosis. La incidencia mundial de esta enfermedad va en aumento, lo que crea un reservorio potencial y un mayor riesgo de infección para humanos y animales. En un intento de identificar nuevos antígenos de superficie de Mycobacterium bovis como prueba de concepto para posibles inductores de inmunidad protectora, investigamos el proteoma de superficie de la cepa BCG de M. bovis cultivada en condiciones similares a las del granuloma. También demostramos que el patógeno expuesto al entorno biológicamente relevante tiene una mayor capacidad de unión e invasión de las células huésped que las bacterias incubadas en condiciones normales de laboratorio. Se identificaron un total de 957 proteínas expuestas a la superficie para BCG cultivadas en condiciones de laboratorio, mientras que 1.097 proteínas se expresaron en condiciones similares a las del granuloma. La sobreexpresión de las proteínas de superficie Mb1524, Mb01_03198, Mb1595_p3681 (PhoU1 igual que phoY1_1) y Mb1595_p0530 (HbhA) en Mycobacterium smegmatis conduce a una mayor unión e invasión de las células de la mucosa. También examinamos la inmunogenicidad de proteínas recombinantes purificadas y probamos M. smegmatis sobreexpresando estos antígenos de superficie para la inducción de inmunidad protectora en ratones. Se observaron niveles significativamente elevados de anticuerpos IgA e IgG específicos en los grupos inmunizados con proteínas recombinantes tanto por vía inhalatoria como intraperitoneal (IP), pero sólo la administración IP indujo niveles elevados de IgA e IgG totales. No se detectaron diferencias importantes en los niveles de anticuerpos en el grupo de M. smegmatis que sobreexpresaba antígenos de superficie. Además, la carga bacteriana se redujo significativamente en los pulmones de los ratones inmunizados con la combinación de proteínas recombinantes inhaladas. Nuestros hallazgos sugieren que la activación de la inmunidad de las mucosas puede conducir a una mayor capacidad de conferir protección frente a la infección por M. bovis BCG.
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