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A Sensitive Fluorescence Biosensor for Silver Ions (Ag+) Detection Based on C-Ag+-C Structure and Exonuclease III-Assisted Dual-Recycling AmplificationBiosensor de fluorescencia sensible para la detección de iones de plata (Ag ) basado en la estructura C-Ag-C y en la amplificación de doble reciclado asistida por la exonucleasa III.

Resumen

Se propone un biosensor de fluorescencia basado en la estructura C-Ag -C con un novedoso diseño de combinación de amplificación de reciclaje dual de la exonucleasa III (Exo III) para la aplicación de la detección de iones de plata (Ag ). Dado que el oligo-1 implica desajustes C-C, la presencia de Ag puede capturarse para formar pares de bases C-Ag -C, lo que da lugar a una estructura de doble hélice con un extremo romo. La estructura de doble hélice puede ser escindida por EXO III para liberar fragmentos cortos de mononucleótidos (ADN desencadenante) y Ag . El Ag liberado puede formar nuevas uniones con el oligo-1, y en los ciclos de digestión pueden producirse otros ADN activadores. La hibridación con el ADN señal (oligo-2) transforma el ADN disparador en ADN bicatenario con terminación roma que puede ser escindido por Exo III para reproducir el ADN disparador y formar ADN cuádruplex de guanina (G-). El ADN disparador vuelve libre a la solución y se hibrida con otro ADN señal, lo que realiza la amplificación de doble reciclaje. El ADN G-cuádruplex se puede señalar mediante N-metilmesoporfirina IX (NMM), un fluorocromo específico del ADN G-cuádruplex. Este método permite determinar Ag en el rango de concentración de 5 a 1500 pmol/L, con un límite de detección de 2 pmol/L, y se ha aplicado con éxito a la detección de Ag en muestras reales.

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