Resumen

Se ha estudiado la biotinilación de la deoxiguanosina en un sitio abásico de oligodesoxinucleótidos bicatenarios. La biotinilación de la deoxiguanosina se consigue mediante una reacción click catalizada por cobre tras la conjugación del oligodesoxinucleótido con 2-oxohex-5-inal. La biotinilación permite visualizar los oligodesoxinucleótidos biotinilados mediante quimioluminiscencia en una membrana de nailon. Para investigar el sitio biotinilado, los oligodesoxinucleótidos biotinilados se amplificaron mediante la reacción en cadena de la ADN polimerasa. La sustitución de la guanina opuesta al sitio abásico por adenina generada por la actividad de la desoxinucleotidil transferasa terminal de la ADN polimerasa se detectó mediante análisis de secuenciación del ADN y digestión con endonucleasas de restricción. Este estudio sugiere que el 2-oxohex-5-ynal puede ser útil para la detección de la desoxiguanosina no apareada generada endógenamente en los sitios abásicos del ADN genómico.

• Materias:Reacciones químicas Análisis cromatográfico Química farmacéutica Análisis químico Análisis espectroquímico
• Subjects:Chemical reactions Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Chemical test Spectrochemical analysis
• Palabras claves:sitio abásico, reacción en cadena de la polimerasa del adn, digestión con endonucleasas de restricción, desoxinucleotidil transferasa terminal, biotinilación, desoxiguanosina, oxohex-5, polimerasa del adn, sitios abásicos, sitio biotinilado
• Keywords:abasic site, dna polymerase chain reaction, restriction endonuclease digestion, terminal deoxynucleotidyl transferase, biotinylation, deoxyguanosine, oxohex-5, dna polymerase, abasic sites, biotinylated site