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Flow cytometry: An efficient method for antigenicity measurement and particle characterization on an adjuvanted vaccine candidate H4-IC31 for TuberculosisCitometría de flujo: Un método eficiente para la medición de la antigenicidad y caracterización de partículas en una vacuna adyuvada candidata H4-IC31 para la Tuberculosis

Resumen

Hemos desarrollado un ensayo basado en la citometría de flujo (FC), preciso y que indica la estabilidad, para medir directamente la antigenicidad de la proteína H4 en una formulación vacunal de H4-IC31, sin desorber la proteína H4 del adyuvante IC31. Este método implica la inmunotinción del complejo H4-IC31 con anticuerpos monoclonales (mAbs) anti-H4, seguida de un análisis de FC. El ensayo no sólo es capaz de medir de forma consistente los niveles de antigenicidad de H4 en H4-IC31 almacenado en condiciones normales a 2-8°C, sino que también es capaz de detectar cambios en la antigenicidad de H4 después de que H4-IC31 se someta a estrés térmico o a congelación-descongelación. Además, el método FC es capaz de caracterizar la morfología de las partículas mientras se mide la antigenicidad. La relevancia biológica de los cambios en la antigenicidad del H4 detectados por el ensayo de FC fue respaldada por un ensayo funcional in vitro basado en células utilizando PBMC humanas para medir la secreción de IFN-gamma (IFN-γ) tras la reestimulación con H4-IC31. Nuestros resultados demuestran que el ensayo de antigenicidad basado en la FC puede supervisar eficazmente las propiedades biológicas y fisicoquímicas del H4-IC31 y es un indicador de la estabilidad del producto vacunal adyuvado.

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Información del documento

  • Titulo:Flow cytometry: An efficient method for antigenicity measurement and particle characterization on an adjuvanted vaccine candidate H4-IC31 for Tuberculosis
  • Autor:He, Liwei
  • Tipo:Artículo
  • Año:2021
  • Idioma:Inglés
  • Editor:OMICS Publishing Group
  • Materias:Agentes estabilizantes Antígenos y anticuerpos Citometría Proteínas
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