Resumen

La cuantificación de proteínas suele ser un paso esencial en cualquier campo de investigación que implique proteínas. Aunque el ensayo estándar de Lowry y sus modificaciones son los más utilizados en la cuantificación de proteínas, los métodos existentes son rígidos o a menudo demuestran una no linealidad entre la concentración de proteínas y la intensidad del color. En el presente estudio se describe un método para la determinación cualitativa y/o cuantitativa rápida y precisa de proteínas totales solubles/insolubles o de proteínas inmovilizadas en placas de micropocillos aisladas de parásitos de Leishmania en microvolúmenes. Es necesario mejorar las técnicas rentables para aumentar los resultados de la investigación en entornos con recursos limitados. Este método es una modificación del establecido ensayo de Lowry para la cuantificación de proteínas. Las concentraciones de las muestras desconocidas se calcularon utilizando una curva estándar preparada con una serie estándar de albúmina de suero bovino (BSA). Los reactivos optimizados fueron 2 N NaOH (hidróxido de sodio), 2% Na2CO3 (carbonato de sodio), 1 uSO4 (sulfato de cobre), 2% KNaC4H4O6 (tartrato de sodio y potasio), y 2 N Folin y fenol de Ciocalteu. Este ensayo de proteínas modificado fue sensible para cuantificar las proteínas de Leishmania en un extracto crudo total o en una fracción soluble dentro del rango aproximado de 10-500 μg/ml (1-50 μg/ensayo) y mostró una linealidad entre la intensidad del color y la concentración de la proteína. Se trata de un método más fácil, rápido y preciso para cuantificar proteínas con microvolúmenes de forma rentable para su uso rutinario en laboratorios de investigación en entornos con recursos limitados.

• Materias:Análisis cromatográfico Nanopartículas Química farmacéutica Análisis químico Método espectrofotométrico
• Subjects:Chromatographic analysis Nanoparticles Chemistry pharmaceutical Chemical test Spectrophotometric method
• Palabras claves:cuantificación de proteínas, ajuste limitado, proteínas, intensidad de color, albúmina de suero bovino, ensayo lowry estándar, tartrato de sodio y potasio, ensayo lowry establecido, métodos, ensayo de proteínas modificado
• Keywords:protein quantification, limited setting, protein, color intensity, bovine serum albumin, standard lowry assay, potassium sodium tartrate, established lowry assay, methods, modified protein assay