La L-asparagina (ASN) es el sustrato catalizador de la L-asparaginasa (ASNasa), que es un medicamento importante para los pacientes con leucemia linfoblástica aguda (LLA). Se ha descubierto que el nivel de ASN está estrechamente relacionado con la eficacia del tratamiento con ASNasa. En este estudio, se desarrolló un método de cromatografía líquida de interacción hidrofílica y espectrometría de masas en tándem (HILIC-MS/MS) para la determinación de ASN en el suero humano utilizando un estándar interno marcado con isótopos estables (ASN-D3). Las muestras de suero se prepararon mediante un procedimiento de precipitación en un solo paso utilizando metanol y se separaron mediante una columna Agilent HILIC Plus con la fase móvil de metanol-agua (95 : 5, v/v, conteniendo 5 mM de formiato de amonio y 0,1 de ácido mórbido), a un flujo constante de 0,3 mL/min. El análisis por espectrometría de masas se llevó a cabo utilizando la monitorización de reacción múltiple en el modo de ionización por electrospray positivo. Las concentraciones de ASN en suero se determinaron en un rango de curva de calibración lineal de 2-200 μM, con precisiones y exactitudes aceptables. El método HILIC-MS/MS validado se aplicó con éxito a la cuantificación de los niveles de ASN en el suero de pacientes con LLA. En conjunto, la investigación puede arrojar nueva luz sobre un método cuantitativo alternativo rápido, simple y conveniente para la determinación de ASN en suero en pacientes con LLA tratados con ASNasa.
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