Resumen

Se evaluó simultáneamente en 3 h o menos un conjunto de 8 ensayos de PCR múltiplex en tiempo real con SYBR Green (SG-PCR) que incluían 3 cebadores diana y un cebador de control de amplificación interna (IAC) con respecto a la detección de 24 genes diana de 23 patógenos transmitidos por los alimentos en 7 muestras de heces de un brote alimentario utilizando una placa de reacción de 96 pocillos. Este ensayo, combinado con la extracción de ADN (kit QIAamp DNA Stool Mini), ofreció una detección de más de 103-104 patógenos de transmisión alimentaria por g en muestras de heces. Los productos formados se identificaron mediante el análisis de la curva de temperatura del punto de fusión (Tm). Este ensayo se evaluó para la detección de patógenos transmitidos por los alimentos en 33 de 35 casos de brote alimentario, utilizando 4 instrumentos de PCR diferentes en 5 laboratorios distintos. No se observaron interferencias del ensayo SG-PCR multiplex en tiempo real, incluida la CAI, en las muestras de heces en ningún análisis. Encontramos que el ensayo SG-PCR multiplex en tiempo real para la detección simultánea de 24 genes diana de patógenos transmitidos por los alimentos es exhaustivo, rápido, barato, preciso, de alta selectividad y bueno para la probabilidad de cribado.

• Materias:Microbiología Bacteriología Genética microbiana Virología Reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
• Subjects:Microbiology Bacteriology Microbial genetics Virology Polymerase chain reaction
• Palabras claves:patógenos transmitidos por los alimentos, muestras de heces, detección, ensayo PCR, brote de origen alimentario, genes diana, tiempo SG, QIAamp DNA Stool Mini kit, tiempo SYBR Green PCR, diferentes instrumentos PCR
• Keywords:foodborne pathogens, stool specimens, detection, PCR assay, foodborne outbreak, target genes, time SG, QIAamp DNA Stool Mini kit, time SYBR Green PCR, different PCR instruments