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Simultaneous Determination of Multiple Active Components from Bushen Pills and Application in a Pharmacokinetic Study in RatsDeterminación Simultánea de Múltiples Componentes Activos de Píldoras de Bushen y Aplicación en un Estudio Farmacocinético en Ratas

Resumen

Las píldoras Bushen (BSP), como medicina tradicional china (MTC), se utilizan ampliamente en clínica para enriquecer el Yang, nutrir el Yin, la esencia del tallo y fortalecer los riñones. Se aplicaron dos métodos cromatográficos, cromatografía líquida-espectrometría de masas (LC-MS) y cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem (LC-MS/MS), para analizar los múltiples componentes activos de las BSP en forma de dosis para la evaluación de la calidad y en plasma de rata para el estudio farmacocinético, respectivamente. Tres componentes activos de BSPs, incluyendo paeoniflorin (PF), berberine hydrochloride (BBR), y schizandrin (SCH), fueron determinados simultáneamente por el método LC-MS establecido con ionización electrospray (ESI) en modo de monitoreo de iones seleccionados positivos (SIM) en m/z 503.1, 336.0, y 455.2. El contenido de PF, BBR, y schizandrin en el plasma de ratas para el estudio farmacocinético, respectivamente, fue determinado por LC-MS/MS. Los contenidos de FP, BBR y SCH fueron de (6,112 ± 0,166) mg/g, (335,1 ± 14,95) μg/g y (5,867 ± 0,136) μg/g en las BSP. Sobre esta base, se seleccionaron PF y BBR como analitos objetivo para el estudio farmacocinético de las BSP en ratas. Se utilizó clorhidrato de memantina como patrón interno (IS), y las muestras de plasma se procesaron mediante extracción líquido-líquido con acetato de etilo. Todos los analitos se separaron en una columna de fase inversa C18, se eluyeron con una fase móvil consistente en acetonitrilo-ácido fórmico (0,01%) (25 : 75, v/v), y se detectaron por ESI en el modo de iones seleccionados con monitorización de reacción múltiple (MRM). Los iones de fragmento objetivo fueron m/z 525,3 ⟶ 449,5 para PF, 336,2 ⟶ 320,2 para BBR, y 180,1 ⟶ 163,1 para IS. Los rangos lineales de PF y BBR fueron 5-500 ng/mL y 0,1-20 ng/mL con buena linealidad (r2 > 0,99). No se observó ningún efecto evidente de la matriz y se obtuvieron una exactitud, precisión, recuperación y estabilidad aceptables. El método propuesto se ha aplicado con éxito al estudio farmacocinético de BSP en ratas tras una dosis única.

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