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Chemometrics-Enabled Raman Spectrometric Qualitative Determination and Assessment of Biochemical Alterations during Early Prostate Cancer Proliferation in Model TissueDeterminación cualitativa y evaluación quimiométrica de las alteraciones bioquímicas durante la proliferación temprana del cáncer de próstata en tejido modelo mediante espectrometría Raman

Resumen

El uso de la espectroscopia Raman combinada con la quimiometra multivariante para el diagnstico de enfermedades ha atrado gran atencin de los investigadores en los ltimos aos. Esto se debe a que se trata de un mtodo de deteccin no invasivo y no destructivo con una mayor sensibilidad. Sin embargo, uno de los principales retos a la hora de analizar espectros de muestras biolgicas ha sido la deteccin de sutiles alteraciones bioqumicas ocultas en el ruido de fondo y de fluorescencia. En este trabajo se presenta una investigacin cualitativa asistida por quimiometra de las sutiles alteraciones bioqumicas asociadas a la malignidad de la prstata en tejido biolgico modelo (lneas celulares de prstata metastsica insensible a los andrgenos (PC3) y normal inmortalizada (PNT1a)). Se adquirieron espectros Raman de clulas PC3 y PNT1a en distintas fases de crecimiento, y sus alteraciones bioqumicas se determinaron a partir de espectros de diferencia entre las dos lneas celulares (para alteraciones prominentes) y anlisis de componentes principales (PCA) (para alteraciones sutiles). Los espectros Raman de diferencia se calcularon restando las intensidades espectrales medias normalizadas de las clulas PNT1a de las intensidades espectrales medias normalizadas de las clulas PC3. Estos espectros de diferencia revelaron alteraciones bioqumicas prominentes asociadas con las clulas PC3 malignas en las bandas de 5660,70 cm, 630 cm, 13700,86 cm y 16181,73 cm. Las relaciones de intensidad de las bandas en 5660,70 cm y 630 cm sugirieron que la malignidad de la prstata puede asociarse a un aumento de las cantidades relativas de cidos nucleicos y lpidos, respectivamente, mientras que las de 13700,86 cm y 16181,73 cm sugirieron que la malignidad de la prstata puede asociarse a una disminucin de las cantidades relativas de sacridos y triptfano, respectivamente. En el anlisis mediante PCA, se utilizaron componentes principales (PC) de orden intermedio y alto para extraer las sutiles huellas bioqumicas asociadas a las lneas celulares. Esto revel sutiles diferencias bioqumicas en 1076cm, (1232, 1234cm), (1276, 1278cm), (1330, 1333cm), (1434, 1442cm), y (1471, 1479cm). Las relaciones de intensidad de banda a 1076cm y 1232cm sugirieron que la malignidad de la prstata puede estar asociada con un aumento de cantidades sutiles de cidos nucleicos y componentes de amida III, respectivamente. El mtodo aqu descrito ha demostrado que pueden extraerse alteraciones bioqumicas sutiles de los espectros Raman de lneas celulares normales y malignas. Las bandas sutiles identificadas podran desempear un papel importante en el seguimiento cuantitativo de las alteraciones tempranas de los biomarcadores asociados a la proliferacin del cncer de prstata.

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