Resumen

Se ha desarrollado un protocolo semiautomatizado de extracción de ARN-VHC utilizando el kit de extracción de ARN Favorgen. El protocolo proporcionado por el kit se modificó sustituyendo los pasos de centrifugado manual por la filtración al vacío. El rendimiento del ensayo se evaluó mediante qPCR en tiempo real basada en la tecnología Taqman. La linealidad del ensayo se confirmó con diluciones seriadas de RTA (Turquía) que contenían 1 × (106, 105, 104 y 103) UI mL-1. La comparación de los resultados de la prueba obtenidos por dos métodos de extracción mostró una buena correlación (r=0,95, n=30) con un límite de detección de 102 UI mL-1. El protocolo basado en la filtración al vacío semiautomatizada demostró un alto rendimiento: 35 minutos para la extracción de un lote de 30 muestras (150 µl cada una) con una reducción de la mano de obra, el tiempo, los residuos y el coste. Las características de rendimiento del sistema semiautomatizado lo hacen adecuado para su uso con fines de diagnóstico y para la determinación de la carga viral.

• Materias:Análisis cromatográfico Química farmacéutica Análisis químico Método espectrofotométrico
• Subjects:Chromatographic analysis Chemistry pharmaceutical Chemical test Spectrophotometric method
• Palabras claves:dilución de rta, extracción de rna favorgen, protocolo de extracción semiautomática, kit de extracción de rna, determinación de la carga viral, filtración al vacío semiautomática, paso de centrifugado manual, comparación de pruebas, protocolo de hcv, tecnología taqman
• Keywords:dilution of rta, favorgen rna extraction, semiautomated extraction protocol, rna extraction kit, viral load determination, semiautomated vacuum filtration, manual spin step, comparison of test, protocol of hcv, taqman technology