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Artículo

Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1Implementation of a fluorometric method for the anti HIV-1 virus reverse transcriptase activity evaluation

Resumen

Se implementó una prueba de tamizaje preliminar para evaluar la potencial inhibición ejercida por productos de origen natural y sintético sobre la actividad de la proteína Transcriptasa Reversa del virus VIH-1, en respuesta a la necesidad de disponer de un ensayo in vitro no radioactivo, relativamente rápido, que arroje resultados válidos, con costos moderados, bioseguro y de fácil acceso. Esta prueba se basa en la capacidad que tiene la proteína transcriptasa reversa viral para formar DNA de cadena sencilla (cDNA) a partir de RNA, utilizando deoxinucleótidos trifosfatados (dNTPs), proceso conocido como transcripción reversa. Para detectar la actividad de la proteína se realizaron ensayos fluorométricos in vitro, usando proteína recombinante sin purificar, y nucleótidos fluorescentemente marcados (Cy3-dCTP) como parte del sustrato. Las condiciones establecidas para la actividad de la proteína fueron 5µg/reacción de RNA total y 2µg/reacción de oligo-dT12-18, reflejadas en 43.6% de incorporación del nucleótido fluoromarcado

  • Tipo de documento:Artículo
  • Formato:pdf
  • Idioma:Español
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Información del documento

  • Titulo:Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1
  • Autor:Aristizabal Gutierrez, Fabio Ancizar; Cordero Camacho, Claudia Patricia; Wilches Arciniegas, Carolina
  • Tipo:Artículo
  • Año:2005
  • Idioma:Español
  • Editor:Universidad Nacional de Colombia
  • Materias:Fluorometría Enzimas Virus de Inmunodeficiencia Humana - VIH
  • Descarga:1

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