Se desarrolló un ELISA fluorimétrico sensible para el análisis de aflatoxinas. El ensayo se realizó en una placa de 384 micropocillos, en la que se utilizó un anticuerpo monoclonal de alta especificidad contra AFM1 (mAb-AFM1) como anticuerpo de captura y un anticuerpo secundario conjugado con FITC para la detección y cuantificación del analito. El rango lineal del inmunoensayo fue de 6,25-50 pg/mL. AFM1 tan bajo como 1 pg/mL fue detectado por este método con un volumen de ensayo de 40 μL. También se investigó el multianálisis de diferentes aflatoxinas en la placa de micropocillos, basado en el enfoque de reactividad cruzada (CR). Se analizaron muestras reales de leche junto con material de referencia certificado mediante el método de adición estándar y se realizó un análisis de recuperación. El mAb-AFM1 mostró 23,2 R con AFB1, 50 R con respecto a AFM2, y la menor RC hacia AFG1 (<1%). Además, se llevó a cabo el análisis de mezclas de AFM2 y AFB1 a concentraciones específicas de AFM1. Las ventajas de este inmunoensayo desarrollado son su alta sensibilidad, alto rendimiento, detección multianalito, versatilidad y facilidad de manejo.
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