Las reacciones adversas de la actual vacuna viva contra la viruela, y el posible uso de la viruela como arma de bioterrorismo, han puesto de relieve la necesidad de desarrollar una nueva vacuna eficaz para esta enfermedad infecciosa. En el presente estudio se produjo un vector de la vacuna de ADN, que se optimizó para la expresión del antígeno L1 del virus de la vaccinia en un modelo de ratón. El IgM-tL1R codificado en plásmido, que contiene un gen L1R truncado fusionado a una secuencia de señales de IgM, se construyó y expresó bajo la regulación de un potenciador SV40. Las proteínas tL1 recombinantes expresadas fueron secretadas con éxito en el medio de cultivo. La vacuna de ADN se administró a ratones por electroporación, y los animales fueron desafiados posteriormente con la dosis letal del virus vaccinia. Observamos que la inmunización con IgM-tL1R inducía respuestas robustas de anticuerpos neutralizantes y proporcionaba una protección completa contra la infección por el virus de la vaccinia. Los estudios de isotipificación revelaron una menor proporción IgG1/IgG2a tras la vacunación con IgM-tL1R, lo que sugiere la estimulación de las respuestas inmunitarias Th1. Nuestros resultados proponen que una vacuna de ADN optimizada, IgM-tL1R, puede ser eficaz para provocar una respuesta inmune al virus de la vacuna y proporcionar protección contra el desafío letal del ortopoxvirus.
Introducción
La viruela, una enfermedad causada por el virus variola, ha sido erradicada del planeta en la década de 1980 tras un programa de inmunización mundial llevado a cabo por la Organización Mundial de la Salud. Sin embargo, existe la preocupación de que el virus de la viruela pueda ser utilizado como un arma biológica. Además, el virus de la viruela del mono, que se asemeja al virus de la viruela, es un virus emergente que causó un brote de viruela del mono humano en África, y más recientemente en los Estados Unidos. Por lo tanto, la necesidad de protección contra estas infecciones de poxvirus permanece [1-3].
La viruela pertenece al género Orthopoxvirus, familia Poxviridae, que también incluye vaccinia, viruela de los monos, viruela de las vacas y otros virus. Debido a que la mayoría del ADN del ortopoxvirus está altamente conservado, se puede conferir una considerable protección cruzada, a través de la infección o la inmunización, dentro de esta familia de virus. Por ejemplo, el virus variola comparte una similitud de más del 90% con el genoma de la vaccinia, lo que permitió la erradicación de la viruela mediante el virus vaccinia. Los ortovirus contienen un gran genoma lineal de ADN de doble cadena que abarca, aproximadamente, 200 marcos de lectura abiertos, y se replican completamente en el citoplasma [4,5]. Los ortovirus tienen dos formas infecciosas, el virión maduro intracelular (IMV), y el virión envuelto extracelular (EEV). Las partículas del IMV se ensamblan en un lugar específico del citoplasma y son traficadas por microtúbulos a sitios de endosomas tempranos o compartimentos de Golgi, donde adquieren una membrana adicional de doble capa, a partir del EEV. Así, la VMI y la VEE están rodeadas por un número diferente de membranas lipídicas.
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