Resumen

La interfaz biomolécula es un elemento clave en la fabricación de inmunosensores, que puede influir enormemente en el rendimiento del sensor. Este trabajo explora los efectos de la cobertura epitópica superficial de la nanopartícula funcionalizada con moléculas pequeñas sobre la afinidad aparente (avidez) del anticuerpo en un ensayo de inhibición competitiva utilizando bisfenol-A (BPA) como diana modelo. Para este estudio se ideó un ELISA no convencional de inhibición competitiva de dos anticuerpos (ci-ELISA) utilizando nanopartículas de oro modificadas con BPA tiolado (cysBPAv-AuNP) como reactivo competidor. Se demostró que la complejación del anticuerpo con cysBPAv-AuNPs requería un número mínimo de epítopos superficiales en la nanopartícula para formar una interacción suficientemente fuerte y una detección fiable. La unión de las cysBPAv-AuNP a los anticuerpos anti-BPA, para sitios de unión de anticuerpos limitados, mejoró con un mayor número de nanopartículas modificadas con epítopos (cysBPAv-AuNP), así como con una mayor cobertura de epítopos. El aumento de la concentración molar del epítopo presente en un ensayo mejoró la unión entre los anticuerpos anti-BPA y las cysBPAv-AuNP. Esto implica que, para aumentar el límite de detección de un ensayo de inhibición competitiva, debe aplicarse una concentración molar reducida de epítopo. Esto podría lograrse disminuyendo la cobertura del epítopo en cada cysBPAv-AuNP o la concentración molar del ensayo de cysBPAv-AuNP o ambos factores.

• Materias:Biotecnología Análisis electroquímico Nanotecnología Bioingeniería Nanoestructuras Nanocompuestos
• Subjects:Biotechnology Electrochemical analysis Nanotechnology Bioengineering Nanostructures Nanocomposites
• Palabras claves:cysbpav, aunp, ensayo de inhibición competitiva, epítopo, anticuerpos bpa, concentración molar, concentración molar del ensayo, elisa de inhibición competitiva, mayor cobertura del epítopo, cobertura del epítopo superficial
• Keywords:cysbpav, aunp, competitive inhibition assay, epitope, bpa antibodies, molar concentration, assay molar concentration, competitive inhibition elisa, higher epitope coverage, surface epitope coverage