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Simvastatin-Loaded Nanomicelles Enhance the Osteogenic Effect of SimvastatinNanomicelas cargadas de simvastatina potencian el efecto osteogénico de la simvastatina

Resumen

Objetivos. El presente estudio tenía como objetivo verificar que las nanomicelas cargadas de simvastatina (SVN) potenciaban el papel de la simvastatina (SV) en la promoción de la diferenciación de los osteoblastos in vitro y evaluar el efecto de las SVN en la reparación de defectos óseos in vivo. Métodos. Se sintetizaron SVNs mediante diálisis. Las células MG63 fueron sometidas a intervención con 0,25 μmol/l de SVNs y SV. Se utilizó un kit de ensayo 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio (MTS) y citometría de flujo para determinar la actividad de proliferación celular, la distribución del ciclo celular y la apoptosis. La diferenciación osteoblástica de las células MG 63 se evaluó midiendo la actividad de la fosfatasa alcalina (ALP), la tinción ALP y los niveles de expresión de las proteínas osterix (Osx) y osteocalcina (OC). Además, se aplicaron 0,5 mg de SVN o SV en la zona del defecto craneal de los conejos. Para la evaluación cualitativa y cuantitativa del hueso nuevo en tres dimensiones y en dos dimensiones se utilizaron la microtomografía computarizada, la tinción con hematoxilina y eosina (HE) y la tinción con tricrómico de Masson. Resultados. Los SVN tenían un diámetro medio de 38,97 nm. Las eficiencias de encapsulación y carga del fármaco fueron de 54,57±3,15 y 10,91±0,63%, respectivamente. In vitro, los SVN y los SV pueden inhibir la actividad de proliferación y promover la diferenciación osteogénica de las células MG63 deteniéndolas en la fase G0/G1 sin aumentar la tasa de apoptosis. Los resultados cuantitativos in vivo mostraron que la densidad mineral ósea (DMO), la relación volumen óseo (VB)/volumen total (VT) y el número trabecular (N.Tb) en el grupo de esponja de gelatina con SVN (SVNs-GS) y en el grupo de esponja de gelatina con SV (SV-GS) fueron 362,1%, 292,0%; 181,3%, 158,0%; y 215,2%, 181,8% de los del grupo de control en blanco (BC), respectivamente. Los resultados histológicos identificaron el nuevo tejido óseo en cada grupo como hueso fibroso irregular, y la disposición del hueso trabecular era desordenada. Había un número significativamente mayor de osteoblastos y nuevos capilares alrededor del hueso trabecular en los grupos SVNs-GS y SV-GS que en los grupos BC y DFNs. Tanto in vitro como in vivo, las SVNs mostraron una mayor eficacia osteogénica que las SV. Conclusiones. Las SVN mejoraron significativamente la eficacia osteogénica de las SV.

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