La epilepsia dependiente de la piridoxina es una afección en la que el bebé o el niño afectado tiene convulsiones prolongadas (estado epiléptico), que no responden a la terapia anticonvulsiva pero que pueden tratarse con dosis farmacológicas de piridoxina. Si se identifican a tiempo y se tratan de forma profiláctica con piridoxina, pueden evitarse daños cerebrales graves debidos a las convulsiones. El semialdehído alfa-amino adípico (AASA), el ácido piperidina-6-carboxílico (P6C) y el ácido pipecólico (PA) son biomarcadores conocidos de la epilepsia dependiente de la piridoxina. Informamos del desarrollo y la validación de una cromatografía líquida de interacción hidrofílica (HILIC) combinada con espectroscopia de masas para la cuantificación de los analitos mencionados a partir de muestras de manchas de sangre secas. Las muestras se extrajeron con metanol y se analizaron en una columna iHILIC fusion plus con tampón de ácido fórmico (pH 2,5): acetonitrilo (20:80) a un flujo de 0,5 mL/min en 3 minutos. El método demostró un LOD de 10 ng/mL, un LOQ de 50 ng/mL, una linealidad de r2 ≥ 0,990 y una recuperación de 92-101,98 para todos los analitos. Los CV de precisión intra e inter diarios fueron
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