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Revising Reverse-Phase Chromatographic Behavior for Efficient Differentiation of Both Positional and Geometrical Isomers of Dicaffeoylquinic AcidsRevisión del comportamiento cromatográfico en fase inversa para la diferenciación eficiente de los isómeros posicionales y geométricos de los ácidos dicaffeoylquinicos

Resumen

Los ácidos dicafoilquínicos (diCQAs) son metabolitos vegetales que sufren una isomerización trans-cis cuando se exponen a la irradiación UV. Como tales, los diCQAs existen tanto en configuración trans- como cis y amplifican el ya de por sí complejo metaboloma vegetal. Sin embargo, la diferenciación analítica de estos isómeros geométricos mediante métodos de espectrometría de masas (EM) ha demostrado ser extremadamente difícil. Por lo tanto, es imperativo explorar el espacio cromatográfico para desarrollar posibles condiciones que ayuden a separar de forma diferencial y determinar el orden de elución de estos isómeros. En este estudio, se investigaron parámetros cromatográficos sencillos, como la química de la columna (fenilo frente a alquilo), la composición de la fase móvil (metanol o acetonitrilo) y la temperatura de la columna, para contribuir a la separación de los isómeros geométricos de diCQA. Los cromatogramas de cromatografía líquida de alto rendimiento con matriz de fotodiodos (HPLC-PDA) revelaron cuatro isómeros tras la irradiación UV de los estándares auténticos de diCQA. Se observó que el perfil/orden de elución variaba en diferentes químicas de columna de fase inversa (fenilo frente a alquilo) utilizando diferentes composiciones de fase móvil. En este caso, se observó que el perfil/orden de elución en las matrices de columna derivadas del fenilo (con metanol como composición de la fase móvil) era relativamente reproducible en comparación con las columnas de alquilo (C18). La resolución cromatográfica de los isómeros geométricos de diCQA puede mejorarse con un aumento de la temperatura de la columna. Por último, el estudio pone de relieve que no se puede confiar en el orden/perfil de elución cromatográfica para comprender la complejidad de los metabolitos isoméricos de las plantas.

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