Resumen

Este artculo describe un inmunoensayo combinado antgeno/anticuerpo implementado en una placa de 96 pocillos mediante un mtodo espectroscpico fluorescente. En primer lugar, se utiliz IgG antihumana de cabra para capturar IgG humana (antgeno modelo); se utiliz IgG antihumana de cabra (Cy3 o FITC) para detectar el antgeno modelo; a continuacin, se aadi un nivel saturante de antgeno modelo seguido de IgG antihumana de cabra no marcada (anticuerpo modelo); por ltimo, se utiliz IgG anti-cabra de conejo marcada con Cy3 para detectar el anticuerpo modelo. Se aplicaron dos enfoques al ensayo concomitante para analizar la viabilidad. El primer enfoque aplic FITC y Cy3 cuando ambas dianas estaban presentes al mismo tiempo, lo que dio como resultado 50ng/mL del lmite de deteccin del anticuerpo y 10ng/mL del lmite de deteccin del antgeno en las mediciones cuantitativas de la concentracin de la diana, teniendo en cuenta la eficiencia FRET del 68% entre el donante y el aceptor. El enfoque secuencial tenda a reducir la relacin seal/ruido (S/N) y la deteccin del antgeno modelo (inferior a 1ng/mL) tena mejor sensibilidad que la del anticuerpo modelo (inferior a 50ng/mL). Este mtodo combinado antgeno/anticuerpo podra ser til para la deteccin combinada de antgenos y anticuerpos. Ser til para detectar tanto antgenos como anticuerpos, especialmente en situaciones de multiserotipos e infecciones por virus mutantes de alta frecuencia.

• Materias:Espectros Raman Aerosoles atmosféricos Método de caída colgante Antígenos y anticuerpos Farmacocinética
• Subjects:Raman spectra Atmospheric aerosols Hanging drop method Antigens and antibodies Pharmacokinetics
• Palabras claves:Antígeno; Anticuerpo; Inmunoensayo; Placa de 96 pocillos; Método espectroscópico fluorescente; Límite de detección
• Keywords:Antigen; Antibody; Immunoassay; 96-well plate; Fluorescent spectroscopic method; Detection limit