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An Efficient Heparin Affinity Column Purification Method Coupled with Ultraperformance Liquid Chromatography for the Quantification of Native Lactoferrin in Breast MilkUn método eficiente de purificación con columna de afinidad de heparina acoplado a cromatografía líquida de ultra rendimiento para la cuantificación de lactoferrina nativa en leche materna

Resumen

La lactoferrina (LF) es una proteína bioactiva multifuncional que se encuentra en grandes cantidades en la leche humana. Se pueden utilizar varios métodos para cuantificar la LF. Sin embargo, la cuantificación de la LF nativa ha suscitado relativamente poco interés hasta la fecha. El objetivo de este estudio era desarrollar un nuevo método eficaz en dos pasos para cuantificar la LF nativa en la leche materna. Durante el análisis, el LF se extrajo primero con tampón fosfato (pH 5,0) y se purificó utilizando una columna de afinidad de heparina. Posteriormente, la LF se detectó mediante cromatografía líquida de ultraperformance (UPLC) a una longitud de onda de 201 nm. Se obtuvo una curva de calibración lineal en el rango de 5-200 mg/L. El límite de detección y el límite de cuantificación fueron de 1 mg/L y 5 mg/L, respectivamente, lo que indica que el método validado puede emplearse para cuantificar LF en la leche materna. En comparación con los métodos HPLC anteriores, este método demostró varias ventajas notables, incluyendo un funcionamiento sencillo, detección de bajo coste y alta precisión. Por lo tanto, los resultados demuestran un método eficiente que puede emplearse comercialmente para purificar y analizar LF en muestras de leche humana.

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