Resumen

El objetivo de este trabajo era validar el ensayo basado en nanopartículas de sílice dopadas con colorante fluorescente conjugado con anticuerpos (FDS-NP) para la detección rápida de Campylobacter jejuni en muestras de pollo utilizando las directrices de validación de un solo laboratorio de la norma ISO16140:2003. Este ensayo invirtió el paradigma de las pruebas microbianas. Las FDS-NP no cultivadas aumentaron la señal de luz fluorescente de la prueba, no el número de células, y redujeron significativamente el tiempo de detección. Los resultados de la validación mostraron que el nivel de detección relativo (LOD) del ensayo era de 103 ufc/ml. Se evaluaron las FDS-NP conjugadas con anticuerpos para la detección de C. jejuni en 140 muestras de pollo recogidas en mataderos (50 de agua de enjuague de canales, 60 de hisopos rectales y 30 de contenido de vísceras) frente al método de referencia ISO 10272 con confirmación por PCR dúplex. La exactitud relativa (AC), la especificidad relativa (SP) y la sensibilidad relativa (SE) fueron del 95,67%, el 100% y el 94,87%, respectivamente. La prueba de inclusividad de las cepas de C. jejuni fue positiva en un 100%. La prueba de exclusividad no demostró reactividad cruzada con 32 cepas de cepas distintas de Campylobacter. El ensayo FDS-NP fue muy rápido y específico, con un tiempo hasta el resultado de 30 minutos en comparación con los 2-5 días requeridos por el método de referencia. Las FDS-NP sin cultivo demostraron un rendimiento comparable al del método de cultivo de referencia para detectar C. jejuni en muestras de aves de corral. Es aplicable para el cribado eficaz de la categoría de productos avícolas.

• Materias:Análisis electroquímico Nanotecnología Nanopartículas Nanocompuestos Nanofibras
• Subjects:Electrochemical analysis Nanotechnology Nanoparticles Nanocomposites Nanofibers
• Palabras claves:fds, nps, ensayo, c. jejuni, muestras de pollo, fds sin cultivo, método de referencia, cepas de c. jejuni, método de referencia con cultivo, confirmación por pcr dúplex
• Keywords:fds, nps, assay, c. jejuni, chicken samples, noncultured fds, reference method, c. jejuni strains, cultured reference method, duplex pcr confirmation