Se desarrolló un método de cromatografía líquida de alta resolución acoplada a espectrometría de masas en tándem (HPLC-MS/MS) para analizar simultáneamente levamisol (LMS) y mebendazol (MBZ) y sus dos metabolitos, 5-hidroximebendazol (HMBZ) y 2-amino-5-benzoilbenzimidazol (AMBZ), en músculo de aves de corral (pollo, pato y ganso). En el proceso de preparación de la muestra, se utilizó acetato de etilo básico como agente de extracción, y las muestras extraídas fueron reextraídas con ácido clorhídrico, purificadas por cartuchos de extracción en fase sólida Oasis MCX (SPE) y reconstituidas en la fase móvil inicial después de secarse con nitrógeno. La separación cromatográfica se realizó en una columna Xbridge C (4.6 mm x 150 mm, 5 m) con ácido fórmico al 0.1% en agua y acetonitrilo como fases móviles, y la elución gradiente se realizó a una velocidad de flujo de 0.6 mL/min y una temperatura de columna de 35 grados Celsius. En muestras en blanco de músculo de aves de corral, las concentraciones añadidas de LMS, MBZ, HMBZ y AMBZ estaban dentro del rango del límite de cuantificación (LOQ) a 25 g/kg. Las áreas de pico de los cuatro fármacos objetivo tenían una buena relación lineal con la concentración, y los valores del coeficiente de determinación (R) fueron superiores a 0.9990. Las recuperaciones promedio de LMS, MBZ, HMBZ y AMBZ fueron del 86.77 al 96.94%; las desviaciones estándar relativas (RSD) intradía fueron del 1.75 al 4.99% en LOQ, 0.5 límite máximo de residuos (LMR), 1.0 LMR y 2.0 LMR; las RSD interdía fueron del 2.54 al 5.52%; y los límites de detección (LOD) y límites de cuantificación (LOQ) fueron de 0.04 a 0.30 g/kg y 0.12 a 0.80 g/kg, respectivamente.