El estrés por salinidad es un importante desafío ambiental que impacta negativamente los procesos fisiológicos y bioquímicos del pasto, lo que resulta en rendimientos reducidos y calidad comprometida. La enmienda con biochar ha surgido recientemente como una estrategia prometedora para aliviar los efectos perjudiciales del estrés por salinidad. Sin embargo, las influencias interactivas del estrés por salinidad y el biochar de paja de trigo sobre las características fisiológicas, bioquímicas y de crecimiento de la alfalfa (L.) siguen siendo poco exploradas. Se llevó a cabo un experimento factorial utilizando un diseño completamente aleatorizado con cinco niveles de salinidad (0, 25, 50, 75 y 100 mM de NaCl) y tres tasas de aplicación de biochar (0, 25 y 50 g kg) para evaluar el potencial del biochar de paja de trigo en aliviar el estrés por salinidad en la alfalfa. Los resultados mostraron que el estrés por salinidad aumentó el estrés oxidativo (peróxido de hidrógeno y malondialdehído) y redujo la fluorescencia de clorofila (eficiencia cuántica máxima del fotosistema II en un 1-27%), lo que llevó a una disminución de los parámetros fotosintéticos, restringiendo así la acumulación de biomasa en un 9-77%. La enmienda con biochar de paja de trigo bajo el mayor estrés por salinidad, particularmente a 25 g kg, mitigó el estrés oxidativo al reducir los niveles de HO y MDA en un 35% y 33%, respectivamente, mientras que disminuyó las actividades de las enzimas antioxidantes CAT, POD y SOD en un 47%, 42% y 39%, respectivamente, en comparación con el control (sin adición de biochar). Al mismo tiempo, el biochar restauró las concentraciones de sustancias osmorreguladoras de prolina y azúcar soluble en un 59% y 33%, respectivamente, en comparación con el control. Además, la enmienda con biochar de paja de trigo aumentó la tasa de asimilación neta de CO en un 98%, aumentando así la biomasa en un 63%. Nuestro estudio demuestra que el biochar de paja de trigo puede contribuir a proteger la alfalfa contra el estrés por salinidad al modular las respuestas fisiológicas y bioquímicas. Estos hallazgos demuestran que la aplicación de 25 g kg de biochar de paja de trigo tuvo el mejor rendimiento, sugiriendo que esta enmienda podría ser una estrategia viable para mejorar la productividad de la alfalfa en suelos afectados por sal. La investigación futura debería explorar aplicaciones de campo a largo plazo y los mecanismos subyacentes de las interacciones biochar-planta-suelo-planta en diversos entornos salinos-alcalinos.