Transformación Mediada de Cultivos de Suspensión Celular de Callo de Tamarillo: Una Nueva Plataforma para Aplicaciones Biotecnológicas
Autores: Ferraz, Ricardo; Casimiro, Bruno; Cordeiro, Daniela; Canhoto, Jorge; Correia, Sandra
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Potencial biotecnológico fuerte
Transformación genética
Cultivos en suspensión celular de tamarillo
Gen de beta-glucuronidasa
Gen de proteína fluorescente amarilla
Producción de metabolitos
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 6
Citaciones: Sin citaciones
El cav. (tamarillo) tiene un gran potencial biotecnológico dado la facilidad de obtener líneas celulares de las cuales se pueden transformar genéticamente. Sin embargo, la transformación genética de cultivos de suspensión celular de tamarillo aún no se ha descrito. Este estudio presenta un método simple para la transformación mediada por - de estas células y demuestra la inserción exitosa del gen beta-glucuronidasa y del gen de la proteína fluorescente amarilla en su genoma. Para el éxito de este protocolo, la selección de callos subcultivados en crecimiento activo como explante y la aislamiento de colonias bacterianas con una densidad celular OD de 0.6-0.8 fueron pasos clave. Además, la inoculación del callo en un cultivo líquido de bacterias, el uso de sonicación y la adición de antioxidantes fueron esenciales. Se confirmó y cuantificó la expresión transitoria del gen en el callo de tamarillo, y no se observaron diferencias significativas entre el uso de las cepas LBA4404 o EHA105. Finalmente, la inserción del gen en el genoma de tamarillo permitió la confirmación in vivo del éxito de la transformación. El presente estudio mostró que los cultivos de suspensión celular de tamarillo pueden ser modificados genéticamente, abriendo el camino para la producción de metabolitos en células transformadas y un futuro escalado en biorreactores.
Descripción
El cav. (tamarillo) tiene un gran potencial biotecnológico dado la facilidad de obtener líneas celulares de las cuales se pueden transformar genéticamente. Sin embargo, la transformación genética de cultivos de suspensión celular de tamarillo aún no se ha descrito. Este estudio presenta un método simple para la transformación mediada por - de estas células y demuestra la inserción exitosa del gen beta-glucuronidasa y del gen de la proteína fluorescente amarilla en su genoma. Para el éxito de este protocolo, la selección de callos subcultivados en crecimiento activo como explante y la aislamiento de colonias bacterianas con una densidad celular OD de 0.6-0.8 fueron pasos clave. Además, la inoculación del callo en un cultivo líquido de bacterias, el uso de sonicación y la adición de antioxidantes fueron esenciales. Se confirmó y cuantificó la expresión transitoria del gen en el callo de tamarillo, y no se observaron diferencias significativas entre el uso de las cepas LBA4404 o EHA105. Finalmente, la inserción del gen en el genoma de tamarillo permitió la confirmación in vivo del éxito de la transformación. El presente estudio mostró que los cultivos de suspensión celular de tamarillo pueden ser modificados genéticamente, abriendo el camino para la producción de metabolitos en células transformadas y un futuro escalado en biorreactores.