Los microorganismos del suelo y el carbono orgánico del suelo (COS) desempeñan roles importantes en el ciclo de los ecosistemas, pero hay una falta de claridad sobre los efectos de la adición de nitrógeno en los microorganismos del suelo y el COS, así como en los principales taxones microbianos que influyen en el COS. Este estudio se llevó a cabo en el humedal alpino del Lago Xiaopo en la cuenca del Lago Qinghai, utilizando NHNO como fuente de nitrógeno, tres gradientes de adición de nitrógeno (N2: 2 g/m, N5: 5 g/m, N10: 10 g/m) y un tratamiento de control en blanco (N0: 0 g/m), con tres experimentos replicados para cada tratamiento. Los principales hallazgos fueron los siguientes: (1) Tanto el aumento de la temperatura del suelo como la disminución de la precipitación redujeron el contenido de COS. El contenido de COS disminuyó gradualmente con el aumento de la concentración de nitrógeno; el COS se redujo entre un 3.36-29.54% y un 8.57-26.66% a profundidades de suelo de 0-15 cm y 15-30 cm, respectivamente. (2) Proteobacteria, Chloroflexi, Acidobacteria y Actinobacteria fueron las principales especies dominantes, y sus cambios determinaron los cambios en toda la comunidad bacteriana. La abundancia relativa de Proteobacteria y Actinobacteria disminuyó con la adición de nitrógeno; Acidobacteria aumentó significativamente; y Chloroflexi no cambió significativamente. La abundancia y diversidad general de las bacterias del suelo mostraron una tendencia creciente. El número de bacterias del suelo es un factor clave que afecta el contenido de COS, y un aumento en el número y la diversidad de bacterias del suelo mejora su capacidad de descomposición, y por lo tanto, reduce el contenido de COS. (3) El aumento de las temperaturas del suelo y la disminución de la precipitación están asociados con la disminución del COS y son los principales factores climáticos que afectan el COS. Este estudio proporciona una referencia para la utilización y gestión racional de los ecosistemas de humedales bajo el cambio climático.