En este estudio se evaluó la influencia de la suplementación con glutamina en el contenido endógeno de aminoácidos, proteínas, fenólicos totales, flavonoides y proantocianidinas en callos de Bacupari. Los explantos se inocularon en medio MS, MS con la mitad de la concentración de sales nitrogenadas (MS½) y MS libre de nitrógeno, suplementado con glutamina (5, 10, 30 y 60 mM) denominadas Gln5, Gln10, Gln30 y Gln60. Se analizaron aminoácidos y proteínas a los 20, 80 y 140 días, y los metabolitos secundarios a los 140 días. No se observaron diferencias en los aminoácidos a los 20 días. A los 80 días, los tratamientos MS y MS½ presentaron los niveles más bajos. A los 140 días, MS y MS½ presentaron la menor concentración de aminoácidos y Gln10 la más alta. En cuanto a las proteínas, solo se observaron diferencias el día 140, observándose las concentraciones más altas en Gln5 y las más bajas en el tratamiento MS½. El contenido total de fenólicos fue mayor en el tratamiento Gln60 y menor en MS. Los tratamientos Gln5, Gln10, Gln30 y MS½ fueron estadísticamente iguales. En cuanto a los flavonoides, los valores más altos se presentaron en los tratamientos Gln30, Gln60 y MS½, y los más bajos en Gln5, Gln10 y MS. De igual manera, para las proantocianidinas, las concentraciones más altas se observaron en el tratamiento Gln60 y las más bajas en Gln5 y MS. En conclusión, el tratamiento con 60 mM de glutamina favorece la acumulación de proteínas y la producción de metabolitos secundarios en el callo de Bacupari.