La palma de areca (L.), un cultivo tropical medicinal, alberga tres virus novedosos: el virus del anillo necrótico de la palma de areca (ANRSV), el virus del punto necrótico en huso de la palma de areca (ANSSV) y ANRSV2, que forman un nuevo género en la familia. Ambos virus presentan una disposición única de proteasas líderes en tándem (HCPro1-HCPro2). Para elucidar el papel de HCPro2, este estudio identificó sus socios de interacción en células infectadas utilizando purificación por afinidad acoplada a cromatografía líquida-espectrometría de masas en tándem, un sistema de dos híbridos de levadura y co-inmunoprecipitación. Se validaron trece proteínas huésped y cinco factores virales (HCPro1, 6K2, VPg, NIa-Pro, NIb) como interactores de HCPro2. Entre las proteínas huésped que interactúan con HCPro2, la expresión de cinco genes fue regulada al alza bajo la condición de infección viral, mientras que la expresión de otros cinco genes fue regulada a la baja. Los ensayos funcionales mostraron que el silenciamiento o la reducción significativa de la acumulación viral. Estos hallazgos revelan la red de interacción virus-huésped de HCPro2, destacando su papel crítico en la patogénesis viral. Una exploración adicional de estas interacciones puede aclarar la importancia evolutiva de las proteasas líderes en tándem e informar sobre nuevas estrategias antivirales para plantas.