Desarrollo y aplicación de un ensayo de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) para la detección de patovares y
Autores: Kant, Pragya; Fruzangohar, Mario; Mann, Rachel; Rodoni, Brendan; Hollaway, Grant; Rosewarne, Garry
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2021
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 12
Citaciones: Sin citaciones
La enfermedad bacteriana de la mancha bacteriana (BB) causa estragos en todo el mundo en cultivos de frutas y verduras económicamente importantes, incluido el guisante de campo (L.). Los dos patovares responsables de la BB en el guisante de campo son el patovar (Psp) y (Pss). En el campo, ambos patovares causan síntomas indistinguibles en el guisante de campo y requieren un diagnóstico de laboratorio para determinar el patovar causal. Para ayudar en el diagnóstico en campo y de laboratorio, se desarrollaron ensayos de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) precisos y robustos para Psp y Pss. Los ensayos pudieron detectar Psp o Pss en células bacterianas vivas o muertas por calor, exudados de plantas, semillas y extractos de ADN sin efectos inhibitorios. Los dos ensayos LAMP específicos desarrollados detectaron Psp y Pss con precisión en menos de 20 minutos y no se observó ninguna reacción cruzada con 18 cepas de especies estrechamente relacionadas de . En comparación con los ensayos de PCR convencionales, los dos ensayos LAMP fueron igualmente específicos pero tienen la ventaja de producir resultados visuales en vivo más rápidos, lo que permite la detección temprana y la diferenciación de Psp y Pss. Nuestros resultados sugirieron un uso potencial de los ensayos LAMP para pruebas de laboratorio y pueden aplicarse en encuestas en campo.
Descripción
La enfermedad bacteriana de la mancha bacteriana (BB) causa estragos en todo el mundo en cultivos de frutas y verduras económicamente importantes, incluido el guisante de campo (L.). Los dos patovares responsables de la BB en el guisante de campo son el patovar (Psp) y (Pss). En el campo, ambos patovares causan síntomas indistinguibles en el guisante de campo y requieren un diagnóstico de laboratorio para determinar el patovar causal. Para ayudar en el diagnóstico en campo y de laboratorio, se desarrollaron ensayos de amplificación isotérmica mediada por bucle (LAMP) precisos y robustos para Psp y Pss. Los ensayos pudieron detectar Psp o Pss en células bacterianas vivas o muertas por calor, exudados de plantas, semillas y extractos de ADN sin efectos inhibitorios. Los dos ensayos LAMP específicos desarrollados detectaron Psp y Pss con precisión en menos de 20 minutos y no se observó ninguna reacción cruzada con 18 cepas de especies estrechamente relacionadas de . En comparación con los ensayos de PCR convencionales, los dos ensayos LAMP fueron igualmente específicos pero tienen la ventaja de producir resultados visuales en vivo más rápidos, lo que permite la detección temprana y la diferenciación de Psp y Pss. Nuestros resultados sugirieron un uso potencial de los ensayos LAMP para pruebas de laboratorio y pueden aplicarse en encuestas en campo.