Desarrollo de un ensayo funcional basado en células para la detección de neurotoxinas botulínicas de Clostridium tipos A y E

El procedimiento estándar para la detección definitiva de Clostridios productores de BoNT es un método de cultivo combinado con la detección de neurotoxinas mediante un bioensayo estándar en ratones (MBA). El bioensayo en ratones es muy sensible y específico, pero es caro y requiere mucho tiempo, además de plantear problemas éticos debido al uso de animales de laboratorio. Los ensayos celulares ofrecen una alternativa al MBA en la detección de Clostridios productores de BoNT. Aquí describimos un ensayo celular que utiliza un constructo reportero de fluorescencia expresado en un modelo celular neuronal para estudiar la actividad de la toxina in situ. Nuestros datos indican que el ensayo puede detectar tan sólo 100 pM de actividad BoNT/A dentro de células vivas, y el ensayo se está evaluando actualmente para el análisis de BoNT en matrices alimentarias. Entre los ensayos in vitro disponibles, creemos que los ensayos basados en células son ampliamente aplicables en cribados de alto rendimiento y tienen el potencial de, al menos, reducir y refinar los ensayos con animales, si no sustituirlos.

Autores: Uma, Basavanna; Tim, Muruvanda; Eric W., Brown; Shashi K., Sharma