Desarrollo de un sistema de edición genética basado en protoplastos para la palma de areca
Autores: Nie, Hao; Batool, Saira; Htwe, Yin Min; Fang, Xiaomeng; Zhang, Dapeng; Shi, Peng; Li, Zhiying; Ma, Mingjun; Su, Hanlu; Yu, Qun; He, Xiangman; Wang, Yong
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Palma areca
Transformación
Edición genética
Protoplastos
Sistema CRISPR/Cas9
Mejora genética
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 10
Citaciones: Sin citaciones
La palma areca (L.) es un cultivo de importancia económica en regiones tropicales y subtropicales. Sin embargo, aún no se ha establecido un sistema eficiente de transformación y edición genética para la mejora genética. En este estudio, se aislaron protoplastos de hojas juveniles, seguidos de una transformación mediada por PEG y edición genética dirigida a la palma areca a través del sistema CRISPR/Cas9. Se aislaron con éxito protoplastos de alta producción (9.08 x 10 células/g de peso fresco) y viabilidad (91.57%) mediante digestión durante 5 horas en una solución enzimática. Se obtuvo una eficiencia de transformación (11.85%) a través de la transformación mediada por PEG (incubación durante 30 minutos en la mezcla que contenía 40% PEG-4000, 400 mM de CaCl, 30 ug de ADN plasmídico y 100 uL de protoplastos). Además, se estableció la localización subcelular mediante la cotransformación de GFP y pNLS-mCherry en los protoplastos. Además, se detectó la eficiencia de edición (2.82%) del uso del sistema CRISPR/Cas9 mediante secuenciación Hi-TOM. Este estudio estableció un sistema eficiente de transformación y edición genética basado en protoplastos en la palma areca, lo que será beneficioso para la verificación de la función génica y la mejora genética en la palma areca y otros cultivos de palma tropical.
Descripción
La palma areca (L.) es un cultivo de importancia económica en regiones tropicales y subtropicales. Sin embargo, aún no se ha establecido un sistema eficiente de transformación y edición genética para la mejora genética. En este estudio, se aislaron protoplastos de hojas juveniles, seguidos de una transformación mediada por PEG y edición genética dirigida a la palma areca a través del sistema CRISPR/Cas9. Se aislaron con éxito protoplastos de alta producción (9.08 x 10 células/g de peso fresco) y viabilidad (91.57%) mediante digestión durante 5 horas en una solución enzimática. Se obtuvo una eficiencia de transformación (11.85%) a través de la transformación mediada por PEG (incubación durante 30 minutos en la mezcla que contenía 40% PEG-4000, 400 mM de CaCl, 30 ug de ADN plasmídico y 100 uL de protoplastos). Además, se estableció la localización subcelular mediante la cotransformación de GFP y pNLS-mCherry en los protoplastos. Además, se detectó la eficiencia de edición (2.82%) del uso del sistema CRISPR/Cas9 mediante secuenciación Hi-TOM. Este estudio estableció un sistema eficiente de transformación y edición genética basado en protoplastos en la palma areca, lo que será beneficioso para la verificación de la función génica y la mejora genética en la palma areca y otros cultivos de palma tropical.