El aumento de la permeabilidad vascular es una respuesta concluyente en el progreso de la inflamación. En condiciones controladas, se sabe que los leucocitos migran a través de las barreras vasculares hacia los focos de inflamación sin que se produzca una ruptura vascular grave. Sin embargo, cuando el estado inflamatorio se vuelve excesivo, pueden producirse fugas de componentes sanguíneos que pueden ser letales. Básicamente, la permeabilidad vascular puede analizarse en función de la intensidad de la salida de sangre. Para evaluar la cantidad y la tasa de fuga en ratones vivos, realizamos la exteriorización del músculo cremáster para visualizar el flujo sanguíneo y la migración de neutrófilos. Mediante microscopía intravital de dos fotones de las vénulas exteriorizadas del músculo cremáster, descubrimos que la función de barrera vascular se ve alterada de forma transitoria y local en la fase inicial del estado inflamatorio inducido por N-formilmetionil-leucil-fenilalanina (fMLP). La medición de la concentración de dextrano Texas Red inyectado por vía intravenosa (i.v.) dentro y fuera de los vasos dio lugar a una clara visualización del aumento de la permeabilidad vascular transitoria y local en tiempo real. Demostramos con éxito fugas repetidas de un sitio diana en un vaso sanguíneo en asociación con el aumento de la gravedad de la inflamación. Por lo tanto, en comparación con otros métodos, la microscopía intravital de dos fotones visualiza y cuantifica con mayor precisión la permeabilidad vascular incluso en una pequeña parte de los vasos sanguíneos en animales vivos en tiempo real.