Se describe una estrategia de entrega de ribonucleoproteínas CRISPR/Cas9 sin portador para la edición del genoma mediada por un plasma atmosférico frío (CAP). El CAP es prometedor en muchas aplicaciones biomédicas debido a la producción eficiente de especies ionizadas bioactivas. Las células cancerosas MCF-7, después de la exposición al CAP, exhiben un aumento de especies reactivas de oxígeno y nitrógeno extracelulares (RONS) y un potencial y permeabilidad de membrana alterados. Por lo tanto, el transporte transmembrana de Ca hacia las células aumenta y acelera la hidrólisis de ATP, lo que resulta en una endocitosis dependiente de ATP mejorada. Posteriormente, el aumento de los contenidos de Ca y ATP promueve la liberación de carga en el citoplasma debido a la mejora en la escape endosomal. La mayor permeabilidad de la membrana también facilita la difusión pasiva de especies extranjeras a través de la membrana hacia el citosol. Después de la exposición al CAP, las células MCF-7 incubadas con ribonucleoproteína Cas9 (complejo Cas9-sgRNA, Cas9sg) de aproximadamente 15 nm muestran una eficiencia de captación del 88.9% y una eficiencia de importación nuclear del 65.9% a través de vías de difusión pasiva y endocitosis dependiente de ATP. El transporte eficiente de Cas9sg activo después del tratamiento con CAP conduce a eficiencias de indel del 21.7% y 30.2% en células HEK293T y MCF-7, respectivamente. Este proceso de transporte mediado por CAP proporciona una alternativa simple y robusta para la entrega de ribonucleoproteínas CRISPR/Cas9 activas. Además, la técnica se puede extender a otras macromoléculas biomoleculares y nanomateriales para atender diferentes aplicaciones biomédicas.