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Un sistema de transformación transitoria mediado por Agrobacterium eficiente utilizando plántulas derivadas de embriones in vitro para la elucidación de la función génica en

Autores: Zhai, Yuhui; Xie, Xinrong; Zhang, Liping; Wang, Xuefei; Zhang, Zixuan; Niu, Lixin; Zhang, Yanlong

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2025

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Acceso abierto

Artículo científico


Categoría

Ciencias Agrícolas y Biológicas

Subcategoría

Botánica

Palabras clave

Económicamente significativo
Ornamental
Hierba medicinal
Cría molecular
Métodos de transformación
Función del gen

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 5

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
es una especie de importancia económica que sirve como ornamental, hierba medicinal y cultivo leñoso de semillas oleaginosas. La elucidación de la función génica y la cría molecular se ven obstaculizadas por la falta de métodos de transformación eficientes y estables debido a los desafíos de cultivo de tejidos. Para permitir estudios funcionales durante todo el año sin restricciones de material, establecimos un nuevo sistema de transformación transitoria mediado por Agrobacterium utilizando plántulas derivadas de embriones in vitro (TTAES). Al optimizar los medios de germinación de embriones, logramos una producción constante de plántulas. Experimentos ortogonales con un reportero GUS identificaron condiciones óptimas: OD = 1.0, 200 M de acetosiringona, seis tratamientos de presión negativa y 2 h de infección. Bajo este sistema optimizado, se logró la máxima eficiencia de transformación a los 35 días después de la germinación. Con este sistema, demostramos su aplicación en la investigación de la regulación mediada por factores de transcripción de los promotores de genes objetivo utilizando GUS como gen reportero. Para lograr la identificación no destructiva de plantas transformadas transitoriamente, empleamos GFP como gen reportero. Utilizando la expresión transitoria de VIGS (knockdown) y construcciones 35S (sobrerregulación), caracterizamos funciones génicas, confirmando así la efectividad del sistema para el análisis funcional. Este sistema facilita la adquisición de materiales experimentales de plantas y mejora significativamente la eficiencia de la investigación para la elucidación de la función génica durante todo el año.

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