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El sistema reportero para el ensayo de GPCR con la levadura de fisión
Los receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) están asociados con una gran variedad de actividades biológicas. Las levaduras son a menudo utilizadas como anfitriones para ensayos heterólogos de GPCR. Ingeniamos plásmidos reporteros intensos para la levadura de fisión para producir proteína fluorescente verde (GFP) a través de su vía endógena de GPCR. Como región de control de la expresión de GFP en el plásmido reportero, nos enfocamos en siete genes endógenos específicamente activados a través de la vía. Cuando las regiones aguas arriba de estos genes se utilizaron como promotor inducible en combinación con el terminador LPI, la región aguas arriba produjo GFP de forma más rápida e intensa a pesar del alto fondo. Posteriormente, el terminador LPI fue reemplazado con las regiones aguas abajo correspondientes. La región aguas abajo SPBC4.01 mejoró la respuesta con un bajo fondo. Además, al combinar la
Autores: Sasuga, Shintaro; Osada, Toshiya
Idioma: Inglés
Editor: Hindawi Publishing Corporation
Año: 2012
Disponible con Suscripción Virtualpro
Artículos
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 10
Citaciones: Sin citaciones
Hindawi
Scientifica
Volume , Article ID 674256, 11 pages
https://doi.org/10.6064/2012/674256
Sasuga Shintaro0, Osada Toshiya0
Department of Life Science JapanAcademic Editor: Blazquez Joaquim Ruiz
Contact: @hindawi.com
Los receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) están asociados con una gran variedad de actividades biológicas. Las levaduras son a menudo utilizadas como anfitriones para ensayos heterólogos de GPCR. Ingeniamos plásmidos reporteros intensos para la levadura de fisión para producir proteína fluorescente verde (GFP) a través de su vía endógena de GPCR. Como región de control de la expresión de GFP en el plásmido reportero, nos enfocamos en siete genes endógenos específicamente activados a través de la vía. Cuando las regiones aguas arriba de estos genes se utilizaron como promotor inducible en combinación con el terminador LPI, la región aguas arriba produjo GFP de forma más rápida e intensa a pesar del alto fondo. Posteriormente, el terminador LPI fue reemplazado con las regiones aguas abajo correspondientes. La región aguas abajo SPBC4.01 mejoró la respuesta con un bajo fondo. Además, al combinar la
Descripción
Los receptores acoplados a proteínas G (GPCRs) están asociados con una gran variedad de actividades biológicas. Las levaduras son a menudo utilizadas como anfitriones para ensayos heterólogos de GPCR. Ingeniamos plásmidos reporteros intensos para la levadura de fisión para producir proteína fluorescente verde (GFP) a través de su vía endógena de GPCR. Como región de control de la expresión de GFP en el plásmido reportero, nos enfocamos en siete genes endógenos específicamente activados a través de la vía. Cuando las regiones aguas arriba de estos genes se utilizaron como promotor inducible en combinación con el terminador LPI, la región aguas arriba produjo GFP de forma más rápida e intensa a pesar del alto fondo. Posteriormente, el terminador LPI fue reemplazado con las regiones aguas abajo correspondientes. La región aguas abajo SPBC4.01 mejoró la respuesta con un bajo fondo. Además, al combinar la