Establecimiento de un sistema de transformación transitoria mediada por - en girasol
Autores: Chen, Fangyuan; Wang, Lai; Huang, Qixiu; Jiang, Run; Li, Wenhui; Hou, Xianfei; Tan, Zihan; Lei, Zhonghua; Li, Qiang; Zeng, Youling
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Girasol
Cultivo oleaginoso
Sal
Sequía
Sistema de transformación transitoria
Función del gen.
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 6
Citaciones: Sin citaciones
El girasol (L.) es un cultivo oleaginoso importante en el noroeste de China, que exhibe resistencia a la sal y a la sequía. La minería de sus excelentes genes de tolerancia puede ser utilizada para la mejora genética. Sin embargo, las plataformas actuales para identificar la función de los genes en el girasol son inadecuadas. El sistema de transformación transitoria, que puede validar rápidamente la función de los genes, muestra perspectivas prometedoras en la investigación. En este estudio, establecimos un sistema de transformación de expresión transitoria eficiente para el girasol utilizando tres métodos: infiltración mediada por -, inyección y ultrasonido-vacío. Los procedimientos detallados fueron los siguientes: se utilizó GV3101 que transporta un gen reportero en el vector pBI121 con una OD de 0.8 como suspensión bacteriana y 0.02% de Silwet L-77 como surfactante en los tres enfoques. Para el método de infiltración, las plántulas cultivadas hidropónicamente durante 3 días se sumergieron en una suspensión bacteriana que contenía 0.02% de Silwet L-77 durante 2 horas; para el método de inyección, la misma solución se inyectó en los cotiledones de plántulas cultivadas en suelo durante 4 a 6 días. Posteriormente, las plántulas se cultivaron en la oscuridad a temperatura ambiente durante tres días; para el método de ultrasonido-vacío, las plántulas cultivadas en placas de Petri durante 3 días fueron sometidas primero a ultrasonido a 40 kHz durante 1 minuto, seguido de infiltración al vacío a 0.05 kPa durante 5-10 minutos. La eficiencia de transformación transitoria mediada por - lograda por los tres métodos superó el 90%, con la expresión génica sostenida durante al menos 6 días. A continuación, empleamos la tecnología de transformación transitoria basada en infiltración del girasol con la plataforma de transformación estable para confirmar la tolerancia al estrés por sal y sequía del gen candidato del girasol en respuesta a varios estreses abióticos. En conjunto, este estudio estableció con éxito un sistema de transformación transitoria mediada por - para el girasol utilizando estos tres métodos, que puede identificar rápidamente la función de los genes y explorar los mecanismos moleculares subyacentes a las características de resistencia del girasol.
Descripción
El girasol (L.) es un cultivo oleaginoso importante en el noroeste de China, que exhibe resistencia a la sal y a la sequía. La minería de sus excelentes genes de tolerancia puede ser utilizada para la mejora genética. Sin embargo, las plataformas actuales para identificar la función de los genes en el girasol son inadecuadas. El sistema de transformación transitoria, que puede validar rápidamente la función de los genes, muestra perspectivas prometedoras en la investigación. En este estudio, establecimos un sistema de transformación de expresión transitoria eficiente para el girasol utilizando tres métodos: infiltración mediada por -, inyección y ultrasonido-vacío. Los procedimientos detallados fueron los siguientes: se utilizó GV3101 que transporta un gen reportero en el vector pBI121 con una OD de 0.8 como suspensión bacteriana y 0.02% de Silwet L-77 como surfactante en los tres enfoques. Para el método de infiltración, las plántulas cultivadas hidropónicamente durante 3 días se sumergieron en una suspensión bacteriana que contenía 0.02% de Silwet L-77 durante 2 horas; para el método de inyección, la misma solución se inyectó en los cotiledones de plántulas cultivadas en suelo durante 4 a 6 días. Posteriormente, las plántulas se cultivaron en la oscuridad a temperatura ambiente durante tres días; para el método de ultrasonido-vacío, las plántulas cultivadas en placas de Petri durante 3 días fueron sometidas primero a ultrasonido a 40 kHz durante 1 minuto, seguido de infiltración al vacío a 0.05 kPa durante 5-10 minutos. La eficiencia de transformación transitoria mediada por - lograda por los tres métodos superó el 90%, con la expresión génica sostenida durante al menos 6 días. A continuación, empleamos la tecnología de transformación transitoria basada en infiltración del girasol con la plataforma de transformación estable para confirmar la tolerancia al estrés por sal y sequía del gen candidato del girasol en respuesta a varios estreses abióticos. En conjunto, este estudio estableció con éxito un sistema de transformación transitoria mediada por - para el girasol utilizando estos tres métodos, que puede identificar rápidamente la función de los genes y explorar los mecanismos moleculares subyacentes a las características de resistencia del girasol.