Los polifenoles en las plantas existen en formas estructurales libres, solubles unidas e insolubles unidas. La concentración de estas formas estructurales depende de la etapa de desarrollo de la planta, el tipo de tejido, la disponibilidad de agua en el suelo y los métodos de preparación de alimentos. En este estudio, por primera vez, se investigaron los efectos de la temperatura de crecimiento (RT-temperatura ambiente-23 grados C durante el día/18 grados C durante la noche, HT-alta temperatura-38 grados C durante el día/33 grados C durante la noche, LT-baja temperatura-12 grados C durante el día/7 grados C durante la noche) sobre las variaciones de las formas estructurales de polifenoles-libres, solubles unidas (esterificadas y glicosiladas) e insolubles unidas-en microgreens de brócoli (L. convar. (L.) Alef. var. Duch.). Utilizando análisis espectrofotométricos, RP-HPLC y análisis estadísticos, se encontró que la mayor cantidad de fenoles totales (TP) en los microgreens de brócoli estaba presente en forma esterificada, independientemente de la temperatura a la que se cultivaron (63.21 +/- 3.49 mg GAE/g dw en RT, 65.55 +/- 8.33 mg GAE/g dw en HT, 77.44 +/- 7.82 mg GAE/g dw en LT). LT aumentó significativamente la cantidad de TP libres (de 13.30 +/- 2.22 mg GAE/g dw en RT a 18.33 +/- 3.85 mg GAE/g dw) y TP solubles esterificados (de 63.21 +/- 3.49 mg GAE/g dw en RT a 77.44 +/- 7.82 mg GAE/g dw), mientras que HT aumentó significativamente la cantidad de formas glicosiladas de TP (de 14.85 +/- 1.45 mg GAE/g dw en RT a 17.84 +/- 1.20 mg GAE/g dw). LT también mejoró las formas libres y esterificadas de flavonoides totales, taninos, ácidos hidroxicinámicos y flavonoles. HT, por otro lado, aumentó las formas glicosiladas de TP, flavonoides, taninos, ácidos hidroxicinámicos, flavonoles y ácidos fenólicos, y disminuyó los taninos insolubles unidos. Según el método ABTS, HT indujo el potencial antioxidante de las formas libres y glicosiladas, mientras que LT aumentó la capacidad antioxidante de las formas libres solamente. Según el método FRAP, LT aumentó el potencial antioxidante de las formas polifenólicas libres y esterificadas. Además, basándose en los ensayos ABTS y FRAP, los polifenoles esterificados mostraron una capacidad antioxidante significativamente mayor que cualquier otra forma. El análisis de componentes principales mostró que la forma estructural tuvo un mayor impacto que la temperatura. El agrupamiento jerárquico mostró que los microgreens de brócoli RT, HT y LT eran más similares en sus polifenoles glicosilados, pero diferían más en las formas esterificadas, que también eran las más distintas en general. En conclusión, HT y LT indujeron cambios específicos en las formas estructurales de los polifenoles del brócoli y su capacidad antioxidante. Basado en los resultados, recomendamos aplicar LT para aumentar la cantidad de polifenoles libres y esterificados en los microgreens de brócoli, mientras que HT puede ser utilizado para mejorar las formas glicosiladas.