Co-expresión del IL-2 porcino y el gen de catelicidina bovina de fusión mediante plásmidos recombinantes en levaduras y su promoción de la defensa antibacteriana en ratones
Autores: Chen, Jianlin; Peng, Junjie; Ma, Changjun; Zhang, Linhan; Wu, Xueyin; Wei, Hong; Li, Jianglin; Lü, Xuebin; Gao, Rong
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2022
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 11
Citaciones: Sin citaciones
Para desarrollar un inmunomodulador efectivo y seguro que mejore la bioactividad antimicrobiana y la inmunidad de los animales contra enfermedades bacterianas infecciosas, se construyó un plásmido recombinante pGAPZalphaA-IL2-B que coexpresa interleucina-2 porcina (PIL-2) y genes de catelicidina bovina fusionada (FBC) utilizando la técnica de autocleavage 2A. Después de ser expresada en la cepa SMD1168 de Pichia pastoris, la levadura recombinante se administró por vía oral a ratonas ICR de 5 semanas de edad. Las ratonas de control recibieron una dosis similar de P. pastoris con un plásmido en blanco o solo el plásmido recombinante FBC. A los 28 días después del tratamiento, las ratonas fueron desafiadas intraperitonealmente con cepas virulentas de uno u otro. En comparación con los grupos de control, las ratonas que recibieron la levadura recombinante que coexpresa PIL-2/FBC manifestaron aumentos significativos en el número de leucocitos, células T CD4+ y CD8+, IgG, y las expresiones génicas de TLRs (TLR1, 4, 6, 9), péptidos antimicrobianos (CRP4 y CRAMP) y citoquinas (IL-2, 4, 6, 7, 12, 15, 23, IFN- y TNF-alfa) en la sangre. Además, las ratonas tratadas mostraron una supervivencia significativamente mayor que los otros dos grupos de control después del desafío. Estos resultados sugieren que la actividad antimicrobiana y la inmunidad de los animales pueden ser efectivamente mejoradas por la coexpresión in vivo de IL-2 y el gen FBS, lo que puede facilitar el desarrollo de nuevas moléculas de inmunopotenciación para superar la infección de bacterias resistentes a los antibióticos.
Descripción
Para desarrollar un inmunomodulador efectivo y seguro que mejore la bioactividad antimicrobiana y la inmunidad de los animales contra enfermedades bacterianas infecciosas, se construyó un plásmido recombinante pGAPZalphaA-IL2-B que coexpresa interleucina-2 porcina (PIL-2) y genes de catelicidina bovina fusionada (FBC) utilizando la técnica de autocleavage 2A. Después de ser expresada en la cepa SMD1168 de Pichia pastoris, la levadura recombinante se administró por vía oral a ratonas ICR de 5 semanas de edad. Las ratonas de control recibieron una dosis similar de P. pastoris con un plásmido en blanco o solo el plásmido recombinante FBC. A los 28 días después del tratamiento, las ratonas fueron desafiadas intraperitonealmente con cepas virulentas de uno u otro. En comparación con los grupos de control, las ratonas que recibieron la levadura recombinante que coexpresa PIL-2/FBC manifestaron aumentos significativos en el número de leucocitos, células T CD4+ y CD8+, IgG, y las expresiones génicas de TLRs (TLR1, 4, 6, 9), péptidos antimicrobianos (CRP4 y CRAMP) y citoquinas (IL-2, 4, 6, 7, 12, 15, 23, IFN- y TNF-alfa) en la sangre. Además, las ratonas tratadas mostraron una supervivencia significativamente mayor que los otros dos grupos de control después del desafío. Estos resultados sugieren que la actividad antimicrobiana y la inmunidad de los animales pueden ser efectivamente mejoradas por la coexpresión in vivo de IL-2 y el gen FBS, lo que puede facilitar el desarrollo de nuevas moléculas de inmunopotenciación para superar la infección de bacterias resistentes a los antibióticos.