El glioblastoma multiforme (GBM) es el tumor cerebral primario más común y agresivo, caracterizado por un alto grado de heterogeneidad intertumoral. Sin embargo, una característica común del microambiente del GBM es la hipoxia, que puede promover la resistencia a la radio y quimioterapia, la inmunosupresión, la angiogénesis y la "stemness". Definimos experimentalmente las adaptaciones comunes del GBM a gradientes de oxígeno fisiológicamente relevantes y evaluamos su modulación por el fármaco metabólico metformina. Exponemos directamente líneas celulares humanas de GBM a hipoxia (1% O) y a fisioxia (5% O). Luego realizamos un perfilado transcripcional y comparamos nuestros hallazgos in vitro con áreas hipoxicas predichas in vivo utilizando análisis in silico. Observamos una respuesta a la hipoxia heterogénea, pero también una firma génica común que fue inducida por un cambio fisiológicamente relevante en la oxigenación de 5% O a 1% O. Los análisis in silico mostraron que esta firma de hipoxia estaba altamente correlacionada con una localización perinecrótica en los tumores de GBM, la expresión de ciertos genes relacionados con la glucólisis y el sistema inmunológico, y un mal pronóstico para los pacientes con GBM. El tratamiento con metformina de líneas celulares de GBM bajo hipoxia y fisioxia redujo el número de células viables, la tasa de consumo de oxígeno y revirtió parcialmente la firma génica de hipoxia, apoyando una mayor exploración de la focalización del metabolismo tumoral como un componente del tratamiento para el GBM hipóxico.