El cannabis es un cultivo versátil que pertenece a la familia Cannabaceae y es dioico, típicamente con plantas masculinas y femeninas separadas. Las flores de las plantas femeninas, especialmente los tricomas, acumulan contenidos relativamente más altos de cannabinoides en comparación con los de las plantas masculinas. Por esta razón, para obtener semillas que sean genéticamente femeninas, es deseable inducir el desarrollo de flores masculinas en una planta femenina que produzca gametos haploides genéticamente femeninos. El tiosulfato de plata (STS) es un químico altamente efectivo para la inducción de flores masculinas. Investigamos la inducción de flores masculinas en tres cultivares comerciales de cannabis femenino (Spectrum303, SuperwomanS1 y CBGambit) en relación con la frecuencia del tratamiento, la etapa de aplicación y la concentración de STS aplicado como spray foliar. Los tres cultivares mostraron una inducción adecuada de flores masculinas en respuesta a 1.5 mM de STS aplicado en la etapa reproductiva temprana. En particular, SuperwomanS1 fue el más sensible a la inducción de flores masculinas, incluso cuando se trató con 0.3 mM de STS en la etapa reproductiva temprana. El tratamiento con tres aplicaciones de STS fue más efectivo en comparación con una sola aplicación, pero una sola aplicación de 1.5 mM de STS en la etapa reproductiva temprana fue suficiente para la inducción de flores masculinas. Una sola aplicación de STS durante la etapa media del crecimiento reproductivo fue inadecuada para la inducción de flores masculinas. Sin embargo, 6 semanas después de tres aplicaciones de STS, CBGambit exhibió aproximadamente un 54% de inducción de flores masculinas a 0.3 mM de STS, Spectrum303 mostró aproximadamente un 56% de inducción a 3 mM de STS, y SuperwomanS1 produjo aproximadamente un 26% de inducción a 1.5 mM (expresado como porcentaje del número total de individuos con las flores masculinas inducidas). Las pruebas de viabilidad del polen utilizando solución KI-I y la tinción de Alexander mostraron una alta viabilidad del polen con más del 65% a diferentes concentraciones individuales de STS, lo que indica que los granos de polen inducidos por STS tienen suficiente viabilidad para la autopolinización. Este estudio demostró que diferentes cultivares de cannabis responden de manera diversa a diferentes concentraciones de STS y destacó los beneficios potenciales de tres aplicaciones de STS durante la etapa reproductiva media para la cría de cannabis.