La citometría de flujo como herramienta para la evaluación de la función leucocitaria sanguínea en Chelonia mydas (Linnaeus, 1758) (Testudines, Cheloniidae)
Autores: Rossi, S; Sá-Rocha, VM; Kinoshita, D; Genoy-Puerto, A; Zwarg, T; Werneck, MR; Sá-Rocha, LC; Matushima, ER
Idioma: Inglés
Editor: Takako Matsumura-Tundisi
Año: 2009
Acceso abierto
Artículo OA
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Licencia
CC BY – Atribución
Consultas: 11
Citaciones: Sin citaciones
Chelonia mydas es una tortuga marina que se alimenta y anida en la costa brasileña, y una enfermedad llamada fibropapilomatosis representa una amenaza para esta especie. Por ello, es fundamental determinar una metodología que permita analizar la función leucocitaria sanguínea en estas tortugas marinas. Para lograr este objetivo, se recolectaron muestras de sangre de C. mydas con o sin fibropapilomas, capturadas en la costa norte de São Paulo. Las muestras de sangre se colocaron en tubos con heparina sódica y se transportaron refrigeradas al laboratorio en medio de cultivo celular estéril RPMI 1640. Los leucocitos se separaron por gradiente de densidad utilizando Ficoll-Paque Plus, Amershan Biociences®. Se aplicaron los siguientes estímulos para evaluar la función leucocitaria: miristato-acetato de forbol (PMA) para evaluar la actividad de estallido oxidativo y Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, conjugado Alexa Fluor® 594 para evaluar la fagocitosis. Se identificaron tres poblaciones celulares: heterófilos, monocitos y linfocitos. Los monocitos fueron las células responsables de la fagocitosis y el estallido oxidativo.
Descripción
Chelonia mydas es una tortuga marina que se alimenta y anida en la costa brasileña, y una enfermedad llamada fibropapilomatosis representa una amenaza para esta especie. Por ello, es fundamental determinar una metodología que permita analizar la función leucocitaria sanguínea en estas tortugas marinas. Para lograr este objetivo, se recolectaron muestras de sangre de C. mydas con o sin fibropapilomas, capturadas en la costa norte de São Paulo. Las muestras de sangre se colocaron en tubos con heparina sódica y se transportaron refrigeradas al laboratorio en medio de cultivo celular estéril RPMI 1640. Los leucocitos se separaron por gradiente de densidad utilizando Ficoll-Paque Plus, Amershan Biociences®. Se aplicaron los siguientes estímulos para evaluar la función leucocitaria: miristato-acetato de forbol (PMA) para evaluar la actividad de estallido oxidativo y Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) Bio Particles®, conjugado Alexa Fluor® 594 para evaluar la fagocitosis. Se identificaron tres poblaciones celulares: heterófilos, monocitos y linfocitos. Los monocitos fueron las células responsables de la fagocitosis y el estallido oxidativo.