El receptor de hialuronano (HA) para endocitosis (HARE) es un receptor multifuncional de depuración de reciclado para 14 ligandos diferentes, incluidos HA y heparina (Hep), que se unen a sitios discretos no solapados. Cuatro motivos endocíticos funcionales diferentes (M) en el dominio citoplasmático (CD) dirigen la captación mediada por fosas recubiertas: (YSYFRI2485 (M1), FQHF2495 (M2), NPLY2519 (M3), y DPF2534 (M4)). Anteriormente descubrimos (Pandey et al. J. Biol. Chem. 283, 21453, 2008) que M1, M2 y M3 median en la endocitosis de HA. Aquí evaluamos la capacidad de las variantes HARE con una deleción de un único motivo o que contienen un único motivo para endocitar HA o Hep. Las variantes con deleción de un único motivo que carecían de M1, M3 o M4 (un subconjunto diferente al implicado en la captación de HA) mostraron una menor endocitosis de Hep, aunque M3 fue el más activo; el resto de motivos redundantes no compensaron la pérdida de otros motivos. Sorprendentemente, una variante de HARE CD con sólo M3 internalizó tanto HA como Hep, mientras que las variantes con sólo M2 o M4 no endocitaron ninguno de los dos ligandos. La internalización de HA y Hep por los mutantes HARE CD dependió de la dinamina y fue inhibida por la hiperosmolaridad, lo que confirma la endocitosis mediada por clatrina. Los resultados indican una complicada relación entre los múltiples motivos CD que dirigen la captación por fosas recubiertas y un papel más fundamental para el motivo M3.