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Lo retro es lo nuevo moderno: aplicación contemporánea de la tinción por impregnación con oro en criosecciones cerebrales para el análisis de imágenes digitales

Autores: Rođak, Edi; Zjalić, Milorad; Cibok, Sara; Viland, Sven; Heffer, Marija; Grgac, Robert; Belovari, Tatjana; Oršolić, Nada; Bijelić, Nikola

Idioma: Inglés

Editor: Maja Herak Bosnar

Año: 2023

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Acceso abierto

Artículo OA


Categoría

Ingeniería y Tecnología

Licencia

CC BY – Atribución

Consultas: 12

Citaciones: Sin citaciones


Descripción

Antecedentes y propósito: Desde la época de Golgi y Cajal, la impregnación con oro o plata se ha utilizado para visualizar detalles microscópicos del tejido nervioso. Aunque la inmunohistoquímica ha reemplazado en gran medida las técnicas de impregnación, estas aún se usan y existe un interés creciente en combinarlas con métodos modernos de análisis de imágenes para estudios cuantitativos en neurociencias. El objetivo de esta investigación fue modificar el método de impregnación con cloruro de oro publicado por Schmued para mejorar la consistencia de la tinción y hacerlo adecuado para el análisis digital de imágenes.

Materiales y métodos: Se fijaron los cerebros de 8 ratas Wistar hembras de seis meses de edad en PFA al 4 %, se crioprotegieron en sacarosa y se congelaron rápidamente en nitrógeno líquido. Se seleccionaron conjuntos vecinos de cortes coronales para impregnación con oro, tinción de Nissl e inmunohistoquímica de MAP2. Se obtuvieron imágenes de portaobjetos completos e imágenes de regiones específicas para su análisis.

Resultados: Las fibras mielinizadas se tiñeron de un color rojizo oscuro a marrón en los cortes impregnados con oro, y el resto del tejido adquirió un tono amarillento, lo que proporcionó un contraste excelente para el análisis digital de imágenes. La tinción con oro fue consistente en todas las regiones y no se observaron artefactos importantes. En comparación con Nissl y MAP2, únicamente las estructuras mielinizadas se tiñeron con la impregnación de oro.

Conclusiones: El método modificado de impregnación con oro es una alternativa comparable a los métodos tradicionales de tinción de mielina. El nuevo método modificado proporciona una tinción consistente y reproducible, adecuada para el análisis digital de imágenes. Puede ser útil en la evaluación morfométrica del tejido nervioso y en la investigación de cambios neuropatológicos en dicho tejido, especialmente en estudios cuantitativos.

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