Las condiciones del hábitat son fundamentales para satisfacer los requisitos esenciales de las especies de mamíferos y garantizar su viabilidad en comunidades naturales. Los Llanos colombianos albergan una alta biodiversidad de mamíferos, pero pocos estudios en esta región han abordado aspectos clave de su historia natural, como el uso y la preferencia de hábitat. En este estudio, evaluamos el uso de bosques de galería y sabanas abiertas por parte de mamíferos medianos y grandes en dos localidades de los Llanos colombianos, analizando las preferencias de hábitat de las especies con la hipótesis de que las especies de mamíferos usarían y preferirían los bosques de galería a las sabanas abiertas. Instalamos 60 cámaras trampa en dos sitios durante 35 días (2100 cámaras trampa/día), cubriendo hábitats tanto de bosques de galería como de sabanas abiertas. La abundancia relativa de las especies detectadas se sometió a análisis de chi-cuadrado e intervalos de confianza del 95 % de Bonferroni para evaluar su uso y preferencias de hábitat. Todas las especies de mamíferos registradas utilizaron el bosque de galería y aproximadamente el 50 % de estas especies lo utilizaron exclusivamente. La preferencia por el bosque fue alta entre los mamíferos, pero algunas especies encontraron recursos complementarios en las sabanas abiertas. Solo los capibaras mostraron una preferencia significativa por la sabana abierta. Destacamos la importancia de conservar los bosques de galería y las sabanas abiertas en los Llanos colombianos para mejorar las condiciones del hábitat que garantizan la supervivencia de los mamíferos. Se debe incentivar a los propietarios de tierras a implementar iniciativas de conservación para garantizar la protección a largo plazo de las áreas naturales que requieren las especies de mamíferos.