Los lipotubuloides de L. contienen microtúbulos hiperestables
Autores: Yogeeswaran, Krithika; Ingerfeld, Manfred; McInnes, Nicholas R.; Gunning, Brian E. S.; Collings, David A.
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Lipotubulóides
Gotas lipídicas
Microtúbulos
Proteínas de fusión GFP
Inmunofluorescencia
Microscopía electrónica de transmisión
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
Las células epidérmicas de las brácteas, pétalos y sépalos de L. (Estrella de Belén, Asparagaceae) contienen lipotubuloides, agregados complejos de gotas lipídicas (GLs) entrelazadas por haces de microtúbulos (MTs). Investigamos la organización y estabilidad de los lipotubuloides a través de la expresión transitoria de proteínas de fusión GFP dirigidas a diferentes estructuras subcelulares y con inmunofluorescencia y microscopía electrónica de transmisión (TEM). La imagenología de células vivas confirmó que los lipotubuloides contienen GLs, orgánulos que incluyen endomembranas, mitocondrias y peroxisomas, una vacuola definida por tonoplasto, y que se mueven a través de un flujo basado en microfilamentos de actina. Curiosamente, los diferentes modos de microscopía utilizados mostraron diferentes patrones de organización de MT en el lipotubuloide. Mientras que las láminas y haces de MT eran visibles por TEM, pocos MT se observaron con proteínas de fusión e inmunofluorescencia. Los experimentos de despolimerización de MT basados en orizalina sugieren una posible resolución para esta paradoja: TEM mostró que los MT de los lipotubuloides resistieron la despolimerización, incluso después de 20 h en orizalina, mientras que la polimerización de MT fue visible en los lipotubuloides con proteínas de fusión durante el lavado de orizalina. Estos resultados sugieren que los lipotubuloides contienen MT hiperstables, posiblemente formados con proteínas asociadas a microtúbulos (MAPs) que normalmente ocluyen los sitios de unión de proteínas de fusión y anticuerpos.
Descripción
Las células epidérmicas de las brácteas, pétalos y sépalos de L. (Estrella de Belén, Asparagaceae) contienen lipotubuloides, agregados complejos de gotas lipídicas (GLs) entrelazadas por haces de microtúbulos (MTs). Investigamos la organización y estabilidad de los lipotubuloides a través de la expresión transitoria de proteínas de fusión GFP dirigidas a diferentes estructuras subcelulares y con inmunofluorescencia y microscopía electrónica de transmisión (TEM). La imagenología de células vivas confirmó que los lipotubuloides contienen GLs, orgánulos que incluyen endomembranas, mitocondrias y peroxisomas, una vacuola definida por tonoplasto, y que se mueven a través de un flujo basado en microfilamentos de actina. Curiosamente, los diferentes modos de microscopía utilizados mostraron diferentes patrones de organización de MT en el lipotubuloide. Mientras que las láminas y haces de MT eran visibles por TEM, pocos MT se observaron con proteínas de fusión e inmunofluorescencia. Los experimentos de despolimerización de MT basados en orizalina sugieren una posible resolución para esta paradoja: TEM mostró que los MT de los lipotubuloides resistieron la despolimerización, incluso después de 20 h en orizalina, mientras que la polimerización de MT fue visible en los lipotubuloides con proteínas de fusión durante el lavado de orizalina. Estos resultados sugieren que los lipotubuloides contienen MT hiperstables, posiblemente formados con proteínas asociadas a microtúbulos (MAPs) que normalmente ocluyen los sitios de unión de proteínas de fusión y anticuerpos.