La roya de la hoja, una devastadora enfermedad fúngica causada por (Pt), impacta severamente la calidad y el rendimiento del trigo. Identificar loci genéticos para la resistencia a la roya de la hoja del trigo, desarrollar marcadores moleculares y criar variedades resistentes es la estrategia más ecológica y económica para el control de enfermedades. Este estudio utilizó una población de líneas recombinantes (RIL) de Doumai y Shi4185, combinada con los datos del chip de polimorfismos de nucleótido único (SNPs) de trigo de 90 K y la severidad máxima de la enfermedad (MDS) de la roya de la hoja de cuatro entornos, para identificar loci de resistencia en plantas adultas (APR) a través de mapeo de ligamiento. Además, se desarrollaron marcadores de PCR específica de alelos competitivos (KASP) adecuados para la cría, y se validaron los efectos genéticos en una población natural. En este estudio, se identificaron 5 loci de rasgos cuantitativos (QTL) en los cromosomas 1B (2), 2A y 7B (2) a través de mapeo de intervalos compuestos inclusivos, y se nombraron como , , , y , respectivamente, explicando entre el 4.54% y el 8.91% de las varianzas fenotípicas. Los alelos de resistencia de y se originaron en Doumai, mientras que los alelos de resistencia de , y provinieron de Shi4185. Entre estos, , y se superpusieron con loci reportados previamente, mientras que y probablemente sean nuevos. Dos marcadores KASP, y , se asociaron significativamente con la resistencia a la roya de la hoja en un panel diverso de 150 variedades de trigo, principalmente de China. En total, se seleccionaron 34 genes candidatos potenciales que codifican las proteínas NLR, quinasas similares a receptores, quinasas de señalización y factores de transcripción como genes candidatos para los loci de resistencia. Estos hallazgos proporcionarán QTL estables, marcadores KASP disponibles para la cría y genes candidatos, y acelerarán los avances en la mejora de la resistencia a la roya de la hoja del trigo a través de la cría asistida por marcadores.