La tecnología (strept)avidina-biotina se utiliza con frecuencia en sistemas de inmunoensayo para mejorar sus propiedades analíticas. Se sabe, a partir de la práctica clínica, que muchos tests basados en (strept)avidina-biotina proporcionan resultados falsos al analizar muestras de pacientes con un alto contenido de biotina endógena. No se ha llevado a cabo ninguna investigación específica sobre posibles interferencias de avidina (AVI) y biotina (B) contenidas en matrices alimentarias en sistemas inmunoanalíticos basados en (strept)avidina-biotina para la seguridad alimentaria. Dos tipos de ELISAs competitivos para la determinación de bacitracina (BT) y colistina (COL) en matrices alimentarias fueron desarrollados basados en conjugados de recubrimiento de hapteno-proteína convencionales y BT y COL biotinilados unidos a estreptavidina inmovilizada (SAV). Los ELISAs basados en complejos de recubrimiento SAV-B-BT y SAV-B-COL proporcionaron una sensibilidad 2 y 15 veces mejor en la determinación de BT y COL, correspondiendo a 0,6 y 0,3 ng/mL, respectivamente. Simultáneamente con la determinación de los analitos principales, estos tipos de pruebas se utilizaron como ensayos competitivos para la evaluación del contenido de AVI o B hasta 10 y 1 ng/mL, respectivamente, en matrices alimentarias (huevo, fórmulas de leche infantil enriquecidas con B, hígado de pollo y ternera). Experimentos sin matriz con soluciones enriquecidas con AVI/B mostraron distorsión de las curvas estándar, indicando que estos ingredientes interfieren con la cuantificación adecuada de los analitos. Resumiendo la experiencia del presente estudio, se recomienda evitar los inmunoensayos basados en interacciones avidina-biotina al analizar biosamples que contienen estos factores endógenos o están enriquecidos con B.