El tratamiento actual del esófago está asociado con una morbilidad significativa. Las estrategias terapéuticas estándar son la interposición gástrica o los autoinjertos derivados del yeyuno y del colon. Sin embargo, reacciones adversas graves, como fuga esofágica, estenosis e infección, acompañan a los tratamientos anteriores, los cuales, la mayoría de las veces, son potencialmente mortales. El objetivo de este estudio fue la optimización de un protocolo de descelularización para desarrollar un adecuado constructo de tejido esofágico ingenierizado. Los esófagos de ratas fueron obtenidos de animales y descelularizados. El proceso de descelularización involucró el uso de buffers de 3-[(3-colamidopropil) dimetilamonio]-1-propanosulfonato (CHAPS) y dodecil sulfato de sodio (SDS) durante 6 h cada uno, seguido por una incubación en un medio de suero. Todo el proceso involucró dos ciclos de descelularización. Luego, se realizó un análisis histológico. Además, se cuantificaron las cantidades de colágeno, glicosaminoglicanos sulfatados y contenido de ADN. El análisis histológico reveló que solo el primer ciclo de descelularización fue suficiente para producir un andamio esofágico celular y libre de núcleos con una adecuada orientación de la matriz extracelular. Estos resultados fueron confirmados además por la cuantificación bioquímica. Basándose en los resultados anteriores, el actual protocolo de descelularización puede ser aplicado con éxito para producir un constructo de tejido esofágico ingenierizado.